目的 研究解聚素-金属蛋白酶17（ADAM17）在胃癌中的表达及其与胃癌患者临床病特征及预后之间的关系。方法 收集本院60例手术切除的胃癌组织和20例正常胃粘膜组织,采用免疫组化SP法检测ADAM17在胃癌及正常胃黏膜组织中的表达情况,分析ADAM17在胃癌中的表达与胃癌患者临床病理特征及预后之间的关系。所有患者签署知情同意书并获得本院伦理委员会批准。结果 60例胃癌组织中ADAM17蛋白表达阳性率为47例,阳性比例78.33%,正常胃粘膜组织中ADAM17蛋白表达阳性率为15.00%（3/20）,两者差异有统计学意义（p<0.01）,表明ADAM17蛋白在胃癌组织中高表达。60例胃癌患者中年龄≥60岁者为34例,其中ADAM17阳性79.41%（27/34）,年龄<60岁者26例,其中ADAM17阳性76.92%（20/26）,P值>0.05,无统计学意义。男性患者21例,其中ADAM17阳性76.19%（16/21）,而女性患者为39例,其中ADAM17阳性79.49%（31/39）,P值>0.05,无统计学意义。关于胃癌病灶的情况,肿瘤直径≥5 cm的患者人数为16例,其中ADAM17阳性75.00%（12/16）,肿瘤直径<5 cm的患者人数为44例,其中ADAM17阳性79.55%（35/44）,P值>0.05,无统计学意义。肿瘤的浸润深度我们以是否侵袭浆膜层为界限,深度为T1T2T3的患者为31例,其中ADAM17阳性64.52%（20/31）,浸润深度为T4者为29例,其中ADAM17阳性93.10%（27/29）,P值<0.05,有统计学意义。局部淋巴结转移的情况,60例患者中有淋巴结转移的患者为36例,其中ADAM17阳性77.78%（28/36）,无淋巴结转移24例,其中ADAM17阳性79.17%（19/24）,P值>0.05,无统计学意义。有远处器官转移的患者为18例,其中ADAM17阳性94.45%（17/18）,而无远处器官转移的患者为42例,其中ADAM17阳性71.43%（30/42）,P值<0.05,有统计学意义。TNM肿瘤分期Ⅰ、Ⅱ期的患者为15例,其中ADAM17阳性46.67%（7/15）,TNM肿瘤分期Ⅲ、Ⅳ期者45例,其中ADAM17阳性88.89%（40/45）,P值<0.05,有统计学意义。总之,60例胃癌患者中ADAM-17蛋白阳性表达与肿瘤浸润深度、远处转移、TNM肿瘤分期有明显相关性,而与患者的年龄、性别、肿瘤大小、淋巴结转移情况无关,且ADAM17阳性表达的胃癌患者预后相对较差。结论 1、ADAM17在胃癌组织中呈高表达。2、ADAM-17蛋白阳性表达与肿瘤浸润深度、远处转移、TNM肿瘤分期及预后有明显相关性,而与患者的年龄、性别、肿瘤大小、淋巴结转移情况无关,提示ADAM17基因在胃癌进展过程中可能起到重要作用。目的 研究解聚素—金属蛋白酶17（ADAM17）对胃癌细胞增殖、侵袭及凋亡能力的影响。方法 根据ADAM17基因m RNA序列（基因库号Accession:NM003183）,在siRNA设计网站设计siRNA序列,设计引物为:5’-GATCCAGATCATCGCTTCTACAGATTCAAGAGATCTGTAGAAGCGATGATCT--TTTTTTA-3’,按照预定序列设计成ADAM17 shRNA,送上海生工合成并测序,对测序正确样品构建质粒后备用。在对比利用脂质体Lipofectamine 2000和X-treme GENE HP的转染效率后,决定采用X-treme GENE HP介导的ADAM17-shRNA转染人胃癌细胞SGC-7901,转染72小时后采用实时荧光聚合酶链反应（RT-PCR）和Western Blot检测转染沉默效率;以CCK8细胞增殖实验、Transwell小室试验、细胞凋亡实验观察通过抑制ADAM17基因表达对人胃癌细胞增殖、侵袭及凋亡的影响。结果 ADAM17 shRNA表达载体构建成功后,我们对比利用脂质体Lipofectamine2000和X-treme GENE HP的转染SGC-7901细胞的转染效率,采用荧光显微镜检测,根据优化的结果,选择X-treme GENE HP:shRNA DNA=4:1的条件转染SGC-7901细胞。转染72小时后采用q PCR定量分析沉默效率、Western Blot验证沉默效率,发现与对照组相比,我们所构建的质粒有效下调了ADAM-17基因m RNA及蛋白产物的表达。我们通过Transwell小室检测三组细胞的侵袭能力,结果表明,在侵袭实验中实验组穿透过Transwell小室的肿瘤细胞数量明显少于对照组。通过取出小室后测量洗脱液OD570值计算抑制率,发现转染组与未转染组对照的抑制率为39.85±4%,差异有统计学意义（p<0.01）,阴性对照组与未转染组对照的抑制率为5.26±2%（p>0.05）。采用CCK8法检测三组细胞的增殖情况并绘制增殖抑制曲线,0小时和24小时的光吸收值在三组之间没有差别;48小时,转染组和未转染组、阴性对照组之间出现增殖差异,并逐渐明显;72小时,转染组和未转染组之间的差异有统计学意义（p<0.01）,而阴性对照组和未转染组之间的差异无统计学意义,说明抑制ADAM-17基因表达对人胃癌细胞SGC-7901增殖有明显的抑制作用。流式细胞术检测转染组和未转染组、阴性对照组细胞凋亡分布变化。我们发现转染组的sub-G1阶段细胞群（细胞凋亡群）与未转染组相比明显增加。转染组细胞凋亡率为13±2%,阴性对照组细胞凋亡率为3±1%（P﹤0.05）。提示ADAM17对胃癌起到抑制凋亡的作用,进一步证实ADAM17表达与胃癌的关系。结论 ADAM17-shRNA通过脂质体X-treme GENE HP转染人胃癌细胞SGC-7901抑制ADAM17蛋白产物表达后,细胞增殖侵袭能力明显下降,细胞凋亡增加,提示ADAM17基因在胃癌进展过程中起到重要作用。目的 研究解聚素-金属蛋白酶17（ADAM17）对胃癌细胞增殖、侵袭、凋亡相关信号通路的影响。方法 采用X-treme GENE HP介导的ADAM17-shRNA转染人胃癌细胞SGC-7901,转染72小时后采用q PCR定量分析沉默效率、Western Blot验证沉默效率,通过Western Blot验证EGFR、AKT和ERK1/2信号通路的蛋白磷酸化水平,用流式细胞仪检测细胞膜受体-结合TNF-α水平,进一步通过Western Blot验证p65、Survivin和caspase-3蛋白的表达,检测ADAM17蛋白的表达与EGFR信号通路、TNF-α信号通路调节的关系。结果 研究结果显示,抑制ADAM17逆转EGFR信号通路的活化水平,表现为EGFR、AKT和ERK1/2磷酸化水平的降低。这些发现表明,抑制ADAM17表达可负向调节EGFR信号通路,以减弱SGC-7901细胞增殖和侵袭。随着ADAM17蛋白的表达明显下调,细胞膜表面结合的TNF-α水平也随之下降。ADAM17-shRNA转染组相对于阴性对照组表现了更低的细胞膜受体-结合TNF-α水平（36±6%;p<0.01）。Western blot法检测ADAM17沉默后各实验组细胞ADAM17蛋白及相关信号通路蛋白的表达,检测p65磷酸化、Survivin和caspase-3蛋白水平,以条带灰度深浅表示蛋白的浓度大小,呈现了相关蛋白的表达水平变化。结果表明,ADAM17抑制对TNF-α信号存在抑制作用,表现为在转染ADAM17-shRNA的细胞中p65磷酸化和Survivin蛋白表达的降低及剪切caspase-3的增加。这些发现表明,抑制ADAM17表达可抑制TNF-α信号通路,从而诱发SGC-7901细胞中的促凋亡效果。结论 ADAM17蛋白的表达与EGFR信号通路、TNF-α信号通路的调节相关,在胃癌细胞的增殖、侵袭、凋亡过程中可能发挥重要作用。