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P-糖蛋白（P-gp）和乳腺癌耐药蛋白（BCRP）是ABC转运蛋白超家族的主要成员。研究显示机体组织中广泛表达的P-gp和BCRP会对临床使用药物的体内过程产生影响,是介导临床发生药物间相互作用的主要因素之一。已证实许多抗生素药物都是P-gp和BCRP的底物。由于减抗限抗政策的推进,寻找有效的抗生素替代品十分必要。大蒜辣素（Allicin）是大蒜的主要有效成分,前期研究显示大蒜辣素具有较好的抗菌活性,作为抗生素替代品具有较好的前景,但是在饲料中长期添加是否会对肉鸡组织中P-gp和BCRP的表达及其底物药物小肠渗透性产生影响,从而介导药物-药物间或药物-饲料成分间相互作用发生,尚不清楚。本论文以此为切入点,研究大蒜辣素对肉鸡小肠的Abcb1（P-gp的编码基因）和Abcg2（BCRP的编码基因）mRNA的表达、底物药物的小肠渗透性以及肉鸡口服氟苯尼考和磺胺嘧啶药动学的影响。研究结果可为临床合理用药提供参考,也可为开发大蒜辣素产品提供基础数据,故具有重要的理论和实践意义。具体研究内容如下:1.大蒜辣素对肉鸡空肠组织Abcb1和Abcg2 mRNA表达的影响本实验通过实时荧光定量PCR研究不同剂量大蒜辣素（按潜在大蒜辣素含量计,32 mg/kg和100 mg/kg饲料）对不同日龄健康肉鸡空肠组织P-gp和BCRP mRNA表达的影响。选取90只1日龄肉鸡,分为不添加大蒜辣素空白组、大蒜辣素不同剂量（32 mg/kg和100 mg/kg饲料）处理组。各组鸡饲喂至不同周龄（2、4及6周龄）时每组分别取10只鸡,测定空肠组织中Abcb1和Abcg2 mRNA的表达水平。Abcb1的研究结果显示:与对照组相比,低剂量（32mg/kg）大蒜辣素饲喂至2周龄的健康肉鸡空肠组织中的Abcb1基因表达量显著降低（P<0.05）,而高剂量组基因表达量无明显变化（P>0.05）;在4周龄时,高、低剂量大蒜辣素处理后的健康肉鸡空肠组织中的Abcb1基因表达量都显著降低（P<0.05）;6周龄时,低剂量组Abcb1基因表达量显著降低（P<0.05）,高剂量组Abcb1基因表达量极显著降低（P<0.01）。Abcg2研究结果显示:与对照组相比,低剂量大蒜辣素饲喂至2周龄时健康肉鸡空肠组织中的Abcg2表达量无明显变化（P>0.05）,高剂量组的Abcg2表达量显著降低（P<0.05）;在4、6周龄时,32 mg/kg和100 mg/kg的大蒜辣素均可极显著（P<0.01）抑制空肠组织中Abcg2的mRNA表达。结果提示大蒜辣素可抑制小肠组织中Abcb1和Abcg2mRNA的表达量。2.大蒜辣素对磺胺嘧啶和氟苯尼考在肉鸡空肠渗透性的影响本实验进一步通过测定磺胺嘧啶（P-gp底物）和氟苯尼考（BCRP底物）在肉鸡空肠的渗透性系数,探讨大蒜辣素对肉鸡小肠P-gp和BCRP外排功能的影响。实验选取60只1日龄肉鸡,分为空白对照组和大蒜辣素（32 mg/kg和100 mg/kg饲料）处理组。肉鸡长至4周龄时,采用空肠在体原位灌流方法,分别测定磺胺嘧啶（n=30）和氟苯尼考（n=30）在肉鸡小肠的渗透性。结果显示:32 mg/kg和100 mg/kg大蒜辣素均对P-gp的底物磺胺嘧啶在AA肉鸡空肠的有效渗透系数有显著影响,空白对照组的有效渗透系数为0.51±0.03（×10-4cm/s）,32 mg/kg大蒜辣素组的有效渗透系数为0.66±0.07（×10-4cm/s,P<0.05）,100 mg/kg大蒜辣素组的有效渗透系数为0.90±0.12（×10-4cm/s,P<0.01）。以BCRP的底物氟苯尼考作为研究药物时,空白对照组的有效渗透系数为0.26±0.01（×10-4cm/s）,32 mg/kg和100 mg/kg大蒜辣素组的有效渗透系数分别为0.57±0.04和0.91±0.08（×10-4cm/s）,均极显著高于空白对照组（P<0.01）。提示大蒜辣素通过抑制P-gp和BCRP的外排作用进而增加磺胺嘧啶和氟苯尼考的小肠渗透性。3.大蒜辣素对肉鸡口服磺胺嘧啶和氟苯尼考药代动力学的影响基于上述结果,本论文进一步讨论了大蒜辣素对健康肉鸡口服磺胺嘧啶和氟苯尼考药动学的影响。以大蒜辣素（32 mg/kg）拌料饲喂AA肉鸡至4周龄后分别进行磺胺嘧啶（n=10）和氟苯尼考（n=10）的体内药动学测定,血浆中磺胺嘧啶和氟苯尼考浓度采用HPLC检测。磺胺嘧啶的药动学结果显示:与空白组比较,磺胺嘧啶在实验组肉鸡的药时曲线下面积AUC极显著增加（31.24±4.70 μg·h/mL vs 41.85±4.79 μg·h/mL,P<0.01）,体清除率 CL 极显著降低（0.62±0.13 mL/h/kg vs 0.45±0.06 mL/h/kg,P<0.01）,Cmax 显著增加（8.40±1.35μg/mL vs 9.82±0.44 μg/mL,P<0.05）,其它药动学参数Tmax、表观分布容积（Vd）、半衰期（T1/2）等参数虽有一定变化,但差异不显著（P>0.05）。氟苯尼考的药动学结果显示:氟苯尼考在实验组肉鸡的药时曲线下面积AUC显著增加（13.52±2.89 μg·h/mL vs 18.38±3.70 μg·h/mL,P<0.05）,体清除率 CL 显著降低（1.51±0.49 mL/h/kg vs 1.13±0.48 mL/h/kg,P<0.05）,其它药动学参数 Tmax、表观分布容积（Vd）、半衰期（T1/2）等参数虽有一定变化,但差异不显著（P>0.05）。综上所述,本研究证实长期拌料饲喂大蒜辣素可抑制肉鸡空肠Abcb1和Abcg2 mRNA的表达水平,影响P-gp底物磺胺嘧啶和BCRP底物氟苯尼考在肉鸡空肠的有效渗透率,进而影响磺胺嘧啶和氟苯尼考在肉鸡体内的药代动力学过程。由此可见,大蒜辣素与P-gp或者BCRP底物联用可促进其体内吸收,在临床应用时应注意由大蒜辣素引起的药物间相互作用。