研究近视发病机制对于防止各种致盲性并发症和探索近视的康复手段都具有极其重要的意义。国内外对哺乳类动物近视眼模型的研究已经表明巩膜的病理性改变表现为：细胞成分减少，细胞外基质表达的改变等。这些是导致眼轴增长和近视性屈光改变的重要原因。大量的近视眼相关研究提示近视的发生是在异常视觉信息的作用下，视网膜、脉络膜内多种神经递质和生长因子的表达发生改变，通过一些系列信号转导过程使巩膜成纤维细胞的增生、代谢和细胞外基质发生改变。已有多种物质被证明可能参与这一信号转导，如多巴胺，乙酰胆碱，一氧化氮等。但是研究者们推测，上述因子并不是直接作用于巩膜细胞和细胞外基质，而是在异常视觉信息导致巩膜病理性改变的信号转导过程中的上游信号分子，它们通过某种特定的因子发挥着对巩膜的终端调控作用。因此，寻找和确定调控巩膜改变的生物活性物质，并同时明确其作用机制是近视研究中的一个关键内容。 转化生长因子-β(transforminggrowthfactor-β，TGF-β)是一类多功能的调节细胞生长、分化的细胞因子。人体内存在TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3三种形式，它们具有相似的生物学作用。TGF-β刚分泌时处于“潜活”状态，在一定条件下被激活并发挥生物学作用。TGF-β对细胞的生长、分化具有双向调节作用，其作用与细胞类型、来源等有关。TGF-β还参与损伤修复、免疫反应、胚胎发育等重要的病理、生理过程晴[50]，亦是细胞外基质的有效调节因子，可增强胶原等的合成，而减少基质的降解，导致细胞外基质的沉积。TGF-β相应受体有三种，称为TβRI、TβRⅡ、TβRⅢ，其中Ⅰ、Ⅱ型受体是参与信息传递的主要分子，TpRill的功能目前尚不明确，可能也是信号转导的组成部分[51]。2004年Jobling等[29]研究发现，哺乳类动物近视眼模型巩膜中转化生长因子-β2的表达显著下降，提示转化生长因子-β2可能是引起巩膜重塑的直接因子。本实就TGF-β2对体外培养豚鼠巩膜成纤维细胞(Guineapigscleralfibroblasts，GSF)的影响作一实验研究，从而探讨TGF-β2与近视发生机制的关系。 材料与方法 随机选取健康三色出生1～3天的豚鼠，雌雄兼用，体重80～120克。体外培养GSF，依次进行原代GSF的形态学观察，GSF的鉴定，免疫组化检测MMP-2(matrixmetalloproteinase-2)／TIMP-2(tissueinhibitorofmetalloproteinase-2)的表达情况。取第3～6代的细胞进行药物实验，观察TGF-β2对体外培养GSF增生的时间、剂量效应关系，对胶原合成的影响以及对MMP-2／TIMP-2表达的剂量效应关系。 结果 1．GSF鉴定阳性，体外培养GSF正常情况下表达MMP-2／TIMP-2，原代、传代培养生长情况良好，冻存复苏后在倒置显微镜下观察形态与冻存前无明显差异。 2．与对照组相比TGF-β2在O．01ng．ml-1～lO．OOng．ml-1浓度范围内与GSF的增生呈剂量效应关系(P＜O．05)，并以10．OOng．ml-1浓度时促进增生作用最显著(P＜0．01)，浓度再增加，其促进增生作用反而略有减弱。 3．从第2天开始试验组和对照组相比较TGF-β2对巩膜成纤维细胞有显著的促增生作用(P＜O．05)。 4．与对照组相比较浓度为0．1ng．ml-1～50．OOng．ml-1的TGF-β2能有效刺激巩膜成纤维细胞胶原蛋白合成，并呈剂量效应关系，当浓度为50．OOng．ml-1时，作用达到饱和 5．TGF-β2在1．OOng．ml-1时上清液中MMP一2的含量与对照组相比明显降低(P＜0．05)，在10．OOng．m1-1-50．OOng．ml-1时下降更为明显(P＜0．01)。而TIMP-2则在O．01ng．m1-1～50．OOng．ml-1范围内随着浓度的增加上清液中的含量没有明显改变。 结论 1．TGF-β2可以显著的促进GSF增生，并呈时间剂量效应依赖关系。 2．TGF-β2一定浓度范围内随着浓度的增加能有效刺激巩膜成纤维细胞胶原蛋白合成，并呈剂量效应关系。 3．体外培养GSF正常情况下表达MMP-2／TIMP-2，TGF-β2在一定浓度范围内随着浓度的增加能够抑制MMP-2的表达，而对TIMP-2表达作用不明显。 4．在哺乳类动物FDM敏感期补充外源性的TGF-β2可能会在一定程度上减缓形觉剥夺性近视的发展。