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本实验论文主要目的是建立一套较为系统、稳定、高效的胚胎培养体系，提高胚胎体外囊胚发育率，从而为提高制作转基因动物、克隆动物、试管动物等的效率提供技术平台。试验设计和结果如下： 试验一为了确定什么时期血清能有效地改善牛体外胚胎囊胚发育率。分别采集发情周期DO、D2、D4和D7山羊血清(发情当天为D0)，灭活除菌备用。进行胚胎培养时，在胚胎培养液中添加10％不同发情时期的山羊血清。试验二为确定大卵泡液是否能提高卵母细胞成熟率和胚胎发育率，将采集的牛大卵泡液(5～10mm)以不同浓度添加在卵母细胞成熟液中，成熟卵母细胞。在卵母细胞成熟液分别添加0％、10％、30％和50％％大卵泡液成熟卵母细胞24h，然后孤雌激活或体外受精，再用胚胎培养液CRlaa中培养。试验三为确定培养条件对胚胎发育的影响。本研究试验如下：(1)精卵共孵育时间对卵裂和后期发育的影响；(2)卵母细胞成熟时间对体外受精胚胎发育的影响；(3)不同类型培养液对牛体外受精胚胎发育潜力的影响；(4)颗粒细胞作为胚胎共培养体系对胚胎发育的影响；(5)不同体积胚胎培养液和使用不同培养器皿对胚胎发育的影响。结果：试验一表明不同发情周期羊血清对孤雌激活胚胎卵裂率影响差异不显著，囊胚发育率分别为29.5％、32.4％、33.9％和41.3％，添加D7血清能显著提高囊胚发育率(P＜0.05)，并且添加D7血清组中扩张和孵化胚出现较早；添加D0血清体外受精胚胎卵裂率较高，但对囊胚发育率影响差异不显著(P＞0.05)。说明孤雌激活和体外受精胚胎发育有差异，D7血清对胚胎后期发育有利。此外受精胚无血清培养3 d后添加10％的D7血清，囊胚发育率为42.9％，为理想血清添加培养程序。试验二在孤雌激活组中，卵母细胞卵裂率差异不显著，但卵泡液组中培养的卵母细胞成熟后得到胚胎囊胚发育率显著高于对照组(P＜0.05)；在体外受精组中随着卵泡液浓度增加而卵裂率显著下降(P＜0.05)，而且囊胚率也下降。10％的卵泡液组中，卵母细胞囊胚分别达到47.1(P＜0.05)％和38.0％。总之，添加10％卵泡液有利于卵母细胞胞质成熟，从而提高了胚胎囊胚的发育率。试验三(1)受精时间12h或24h，对胚胎卵裂率无显著影响(P＞0.05)，但胚胎24h组发育快于12h组；(2)成熟24h和32h对卵裂率有显著影响，分别为58.7％和31.3％(P＜0.05)，囊胚率无差异；(3)培养液CRl+BSA和SOF+BSA对胚胎发育差异不显著，但是囊胚发育率显著高于完全限定培养液(P＜0.05)；(4)颗粒细胞共培养能显著的提高囊胚发育率，囊胚率达39.1％(P＜0.05)；(5)培养液0.5ml和2.0ml对于胚胎发育效果好于0.1ml微滴，囊胚分别是36.4％；32.9％和6.8％(P＜0.05)。结论：(1)发情第7天山羊血清对胚胎发育有利，发情当天血清能够显著提高体外受精卵的卵裂率；(2)受精卵无血清培养3d后，添加10％的发情第7天的山羊血清，囊胚发育率为42.9％；(3)添加10％的牛卵泡液有利于卵母细胞胞质成熟，使囊胚的发育率提高到47.1％；(4)卵母细胞成熟培养24h，精卵共孵育24h，用CRlaa+BSA为培养液(0.5ml，4孔板)，颗粒细胞摘要共培养，为较好的培养体系;(5)相同条件下，孤雌激活胚胎和体外受精胚胎的囊胚发育率有差异。