目的:使用YB-1及其SiRNA重组腺病毒载体转染人乳腺癌细胞株MCF-7,观察YB-1对乳腺癌MCF-7细胞中CD44表达及细胞迁移、侵袭和成球能力的影响。　　 方法:1.用YB-1重组腺病毒载体(pAdEasy-1-hYB1,简称AD-YB-1)和YB-1 SiRNA腺病毒载体(pAdEasy-1-pshuttleH1-siYB1,简称ADSi—YB-1),以及对照载体(AD-GFP,ADSi-Control)分别转染MCF-7细胞后,用RT-PCR和Western Blot法检测YB-1和CD44的表达量,免疫荧光法检测CD44的表达变化；2.用MTT法检测细胞转染前后的增殖情况,并绘制生长曲线；用RT-PCR和Western Blot法检测转染后MCF-7细胞中MDR1的表达改变,用MTT法检测阿霉素IC50值,以检测细胞的耐药性。用Transwell小室检测转染前后MCF-7细胞的迁移及侵袭能力的改变；细胞使用无血清培养基培养,并加入表皮生长因子EGF(20ng／ml)和碱性成纤维细胞生长因子bFGF(10ng／ml)后,观察YB-1对细胞成球能力的影响。　　 结果:1.在MCF-7细胞转染AD-YB-1,ADSi-YB-1和对照空载体48小时后,提取各组细胞RNA和总蛋白,RT-PCR和WesternBlot都显示YB-1重组腺病毒载体转染后,YB-1和CD44表达高于空载体和未转染对照组,其中YB-1表达分别增高1倍和1.5倍(P<0.01),CD44表达分别增高0.7和0.8倍(P<0.05)。而YB-1SiRNA腺病毒载体转染后,YB-1和CD44表达均低于空载体和未转染对照组,其中YB-1表达分别降低1.2倍和1倍(P<0.01),CD44的表达分别降低0.67倍和0.8倍(P<0.05)。免疫荧光实验也显示YB-1上调能提高CD44蛋白的荧光强度,而YB-1下调能降低CD44蛋白的荧光强度。2.通过YB-1基因及其SiRNA重组腺病毒载体转染MCF-7细胞后绘制的生长曲线发现,与对照组相比,YB-1表达上调后,MCF-7细胞的增殖能力增强；而YB-1表达下调,能相应地降低细胞的增殖能力,结果均有统计学意义(P<0.05)。用RT-PCR和Western Blot法检测MCF-7细胞MDR1表达水平发现,空载体转染对照组和未转染对照组的MCF-7细胞几乎不表达MDR1,而当YB-1的表达上调时,MDR1表达明显上升(P<0.01)。MTT法检测IC50也发现,上调YB-1的表达能提高MCF-7细胞的IC50值(约0.9倍(P<0.05))。Transwell小室实验发现,与对照组相比,AD—YB-1转染后MCF-7细胞穿过聚碳酸酯膜的数目明显增加(P<0.01),提示细胞的转移和侵袭能力增加；而YB-1表达的降低能有效地降低细胞迁移的数目(P<0.01)。CD44是乳腺癌的干细胞标记基因,我们的细胞成球实验证明,YB-1的表达上调,从而引起CD44表达提高后,细胞的成球数增加(P<0.05)；反之,当YB-1的表达下调时,细胞的成球数明显减少(P<0.05)。　　 结论:1.在MCF-7细胞中YB-1与CD44的表达呈正相关。2.YB-1高表达能引起MCF-7细胞增殖,迁移,耐药和成球能力的增加,而YB-1表达下调后细胞的这些生物学特性降低。这些结果显示,YB-1可能通过调控CD44的表达影响人乳腺癌细胞MCF-7的增殖、侵袭、耐药及成球能力。以YB-1为靶点的肿瘤治疗可能成为一种新的有效的治疗肿瘤的途径。