目的：观察来氟米特(LEF)对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)的防治作用。探讨LEF对EAE防治作用的免疫学机制。方法：将60只雌性Wistar大鼠随机分成5组：空白对照组、EAE对照组及小、中、大剂量LEF防治组,每组12只。使用粗制髓鞘碱性蛋白(MBP)及完全弗氏佐剂制成免疫抗原,皮下注射制作 EAE 模型,空白对照组仅注射等量完全弗氏佐剂。自造模之日前三天起,小、中、大剂量LEF防治组分别予以LEF0.5mg/kg/d、2mg/kg/d、8mg/kg/d灌胃,空白对照组及EAE对照组每日以生理盐水2ml灌胃,连续10天。记录Wistar大鼠发病率、发病潜伏期、进展期及发病高峰期神经功能障碍评分。在发病高峰期时处死大鼠,未发病及空白对照组4周后处死。留取大鼠脑脊髓组织、胸腺及眶静脉血。大鼠脑脊髓组织处理后做HE 染色,通过酶联免疫吸附法( ELISA )测定外周血单个核细胞(PBMC)分泌 IL-4 及 IFN-γ水平,通过放射免疫法检测脑组织细胞因子IL-2、IL-6、TNF-α含量,通过流式细胞仪测定外周血T细胞亚群分布以及胸腺细胞凋亡率。结果：(1)Wistar大鼠发病情况：空白对照组大鼠未发病；EAE 对照组发病率 100%；小、中、大剂量LEF防治组部分动物发病,发病率分别为83.33%、66.67%、58.33%。EAE对照组发病潜伏期11.00±1.28天,小、中、大剂量LEF防治组发病潜伏期分别为17.10±0.88天、20.63±1.06天、22.71±0.95天, LEF 各防治组发病潜伏期均比 EAE 对照组长(P<0.01),剂量依赖关系明显。EAE 对照组发病进展期 6.83±0.72 天,小、中、大剂量LEF防治组发病进展期分别为5.20±0.79天、4.00±0.76天、3.00± 0.82天,LEF各防治组发病进展期均比EAE对照组缩短(P<0.01),呈剂量依赖关系。EAE 对照组发病高峰期神经功能障碍评分为 4.00 ±1.54 分,小、中、大剂量 LEF 防治组发病高峰期神经功能障碍评分为2.67±1.83、1.83±1.80分、1.17±1.34分,大、中剂量LEF防治组发病高峰期神经功能障碍评分较EAE对照组评分低(P<0.01),小剂量LEF防治组与EAE对照组相比差异不具有统计学意义(P>0.05)；大剂量 LEF 防治组发病高峰期神经功能障碍评分较小剂量LEF防治组低,差异具有统计学意义(P<0.05),中剂量LEF防治组发病高峰期神经功能障碍评分较小剂量 LEF 防治组低,差异无统计学意义(P>0.05)；大剂量LEF防治组发病高峰期神经功能障碍评分较中剂量LEF防治组低,但差异不具有统计学意义(P>0.05)。(2) EAE对照组及小、中、大剂量LEF防治组Wistar大鼠脑及脊髓病理学改变情况：空白对照组大鼠脑组织无异常。EAE对照组及LEF各防治组大鼠脑组织实质内血管周围有大量炎性细胞浸润,其中以淋巴细胞浸润为主同时伴有少量的单核细胞,典型者形成“袖套”样的改变。LEF各防治组炎性细胞浸润严重程度与EAE对照组相比病理改变减轻,且剂量越大减轻程度越明显。(3)LEF对EAE大鼠发病高峰期脑组织中 IL-2、IL-6、TNF-α含量的影响：EAE 对照组发病高峰期脑组织中IL-2、IL-6、TNF-α含量较空白对照组明显增高(P<0.01),LEF 各防治组发病高峰期脑组织 IL-2、IL-6、TNF-α 含量较EAE 对照组明显降低(P<0.01),大、中剂量 LEF 防治组大鼠发病高峰期脑组织IL-2、IL-6、TNF-α含量较小剂量LEF防治组组降低(P<0.01),大剂量 LEF 防治组发病高峰期脑组织 IL-2、IL-6、TNF-α含量较中剂量LEF防治组降低(P<0.01)。(4)EAE对照组及LEF各防治组大鼠发病高峰期PBMC分泌IL-4及INF-γ能力及其比值：EAE对照组大鼠发病高峰期PBMC分泌IL-4能力、IL-4/INF-γ值较空白对照组降低(P<0.01),分泌 INF-γ 能力较空白对照组增强(P<0.01)；LEF各防治组PBMC分泌IL-4能力、IL-4/INF-γ值较EAE对照组明显增高(P<0.01),分泌INF-γ能力较EAE对照组明显降低(P<0.01)；大、中剂量LEF防治组大鼠发病高峰期PBMC分泌IL-4能力、IL-4/INF-γ值较小剂量LEF防治组明显增高(P<0.01或P<0.05),分泌 INF-γ 能力较小剂量 LEF 防治组降低(P<0.01)；大剂量 LEF防治组大鼠发病高峰期PBMC分泌IL-4能力、IL-4/INF-γ值较中剂量LEF组明显增高(P<0.01),分泌INF-γ能力较中剂量LEF防治组降低(P<0.01)。(5)EAE对照组及LEF各防治组发病高峰期T细胞亚群的分布变化：EAE组发病高峰期外周血T细胞亚群CD4+、CD8+分布比例较空白对照组明显降低(P<0.01),CD4+/CD8+值明显增高(P<0.01)；LEF各防治组发病高峰期期外周血CD4+、CD8+分布比例较EAE对照组明显增高(P<0.01),CD4+/CD8+值明显降低(P<0.01)；大、中剂量LEF防治组大鼠发病高峰期外周血CD4+、CD8+分布比例较小剂量 LEF 组明显增高(P<0.01),CD4+/CD8+值明显降低(P<0.01),大剂量LEF防治组发病高峰外周血CD4+、CD8+分布比例较中剂量LEF组明显增高(P<0.01),CD4+/CD8+值降低不明显(P>0.05)。(6)EAE对照组及LEF各防治组发病高峰期胸腺细胞凋亡率变化：EAE 对照组胸腺细胞凋亡率较正常对照组明显增高(P<0.01),LEF各防治组发病高峰期胸腺细胞凋亡率较EAE对照组降低 (P<0.01)；大、中剂量LEF防治组胸腺细胞凋亡率较小剂量LEF防治组低(P<0.01),大剂量LEF防治组胸腺细胞凋亡率较中剂量LEF防治组低(P<0.01)。(7)相关性分析：EAE对照组及LEF各防治组发病潜伏期与发病高峰期 IL-2、IL-6、TNF-α、CD4+/CD8+及胸腺细胞凋亡呈负相关(P<0.01或P<0.05),与IL-4/INF-γ值呈正相关(P<0.01或P<0.05)；EAE对照组及LEF各防治组发病进展期与发病高峰期IL-2、IL-6、TNF-α、CD4+/CD8+及胸腺细胞凋亡呈正相关(P<0.01或P<0.05),与IL-4/INF-γ值呈负相关(P<0.01或P<0.05)；EAE对照组及 LEF 各防治组发病高峰期神经功能障碍评分与发病高峰期 IL-2、IL-6、TNF-α、CD4+/CD8+及胸腺细胞凋亡呈正相关(P<0.01或P<0.05),与IL-4/INF-γ值呈负相关(P<0.01或P<0.05)。结论：1. Wistar大鼠通过注入豚鼠脊髓匀浆可以成功制作EAE模型。2.EAE大鼠高峰期脑组织炎性细胞因子产生增多,Th1/Th2比例失衡,Th0分化向Th1漂移,T淋巴细胞亚群分布异常,胸腺细胞凋亡异常。3. LEF可以降低 EAE 大鼠发病率,延长其发病潜伏期、缩短进展期,同时减轻高峰期临床症状、减轻脑脊髓炎症细胞浸润,LEF对EAE大鼠发病具有防治作用。4.LEF 通过抑制 EAE 大鼠炎性细胞因子产生、纠正Th1/Th2比例失衡、调节T淋巴细胞亚群异常分布、抑制EAE大鼠胸腺细胞的异常凋亡而发挥对EAE的防治作用。