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目的:随着经济的发展,人民生活水平的提高,人口老龄化以及生活方式的改变,2型糖尿病(T2DM)的发病率显著增高,成为威胁人类的世界性公共卫生问题。T2DM是一种由遗传因素与环境因素相互作用所引起的以血糖升高为临床特征的复杂性疾病,糖尿病的遗传是对糖尿病的易感性而非疾病本身,对易感基因的搜寻和鉴定已成为目前研究的热点。另一方面近年来糖尿病炎症学说逐渐形成,并得到广泛认同。该学说认为T2DM是细胞因子介导的一种慢性低水平的炎症反应,而趋化因子能通过炎症反应参与糖尿病与胰岛素抵抗的发生发展,与其他机制共同加快糖尿病病程的进展。因此,趋化因子作为T2DM发病可能的危险因素之一,成为当今热点研究之一。目前有研究表明,CXCL5基因多态性影响基因表达水平,指出-156位点携带C等位基因者其血浆CXCL5浓度显著升高,并直接影响白细胞产生CXCL5。最近调查的伊朗人群CXCL5-156G/C位点的基因多态性与T2DM密切相关。但是基因多态性的分布与人种和地区有关。为此我们采用聚合酶链式反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,探讨中国河北省秦皇岛地区汉族人群CXCL5基因启动子-156G/C的多态性与T2DM的关系。
方法:采用基于人群的病例-对照研究方法,随机收集T2DM患者210例,对照组171例。所有受试者均测量身高、体重、并计算体重指数(BMI)、应用全自动生化分析仪测定血总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。提取外周血白细胞DNA,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chainreaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)方法检测糖尿病组及对照组CXCL5启动子区-156C基因多态位点(G/C)的基因型频率分布。初步探讨CXCL5启动子区-156C基因多态位点(G/C)的基因型频率分布与T2DM遗传易感性的关系。
数据统计分析采用SPSS11.5版软件包(SPSS Company, Chicago,Illinois,USA)进行资料分析,P<0.05认为有统计学意义。计量资料采用x±SD表示,两个样本比较采用t检验,HOMA-IR呈偏态分布,做自然对数转换成正态分布后再行t检验。T2DM组与对照组基因型频率分布均进行Hardy-Weinberg平衡分析。病例组与对照组的基因型、等位基因频率分布比较采用行×列表卡方检验,并对基因型及等位基因频率分布进行相对发病风险分析,计算比值比(odds ratio,OR)及其95%可信区间。
结果:
1 研究对象的一般特征
1.1T2DM中男性105例,女性105例,平均年龄为54.09±12.43岁,年龄分布为27-74岁。对照组中男性88例,女性83例,平均年龄52.64±11.46岁,年龄分布为29-74岁。T2DM患者组与对照组间的性别、年龄构成比均差异无统计学意义(P>0.05)。
1.2T2DM组FBG、FINS、TG、TC、LDL-C、HOMA-IR高于对照组差异有统计学意义(p<0.001),T2DM组HDL-C低于对照组差异有统计学意义(p<0.05),BMI两组比较无统计学意义(p>0.05)。
2 T2DM组与对照组CXCL5基因多态性的比较
T2DM组与对照组基因型分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡规律(p>0.05),说明两组CXC15基因型的检测结果具有代表性。
T2DM组G/G、G/C、C/C基因型频率分别为59.05%,34.29%,6.67%;对照组G/G、G/C、C/C基因型频率分别为61.98%,35.09%,2.92%。T2DM组G和C等位基因频率分别为76.19%和23.81%;对照组的G和C等位基因频率分别为79.53%和20.47%。T2DM组和对照组基因型和等位基因分布上差异无统计学意义(x2=2.80,p=0.247;x2=1.029,P=0.310)。
3 T2DM组与对照组不同CXCL5基因型的临床特征
3.1对照组中携带C基因型(G/C+C/C)者与携带G/G基因型者比较,年龄、性别、TG、TC、LDL、HDL差异无统计学意义(p>0.05);携带C基因型(G/C+C/C)的患者FBG、FINS、HOMAIR、BMI高于携带G/G基因型者,差异有统计学意义(P<0.05)。
3.2 T2DM组中携带C基因型(G/C+C/C)的患者与携带G/G基因型的患者年龄、性别、TG、HDL差异无统计学意义(p>0.05)。携带C基因型(G/C+C/C)的患者FBG、FINS、HOMAIR、BMI、TC、LDL均高于携带G/G基因型的患者,差异有统计学意义(p<0.05)。
4 不同性别的CXCL5基因型在T2DM的临床特征
4.1 T2DM男性患者中C基因型(G/C+C/C)的患者BMI、FBG、FINS、HOMA-IR均高于携带G/G基因型的患者,差异有统计学意义(p<0.05),TG、TC、LDL、HDL两组之间差异无统计学意义(p>0.05)。
4.2 T2DM女性患者中C基因型(G/C+C/C)的患者BMI、FBG、FINS、InHOMA-IR均高于携带G/G基因型的患者,差异有统计学意义(p<0.05),TG、TC、LDL、HDL两组之间差异无统计学意义(p>0.05)。
5 不同种族CXCL5等位基因频率
本研究对照组C等位基因频率与西班牙人、美国人及英国高加索人比较差异无统计学意义(p>0.05),高于伊朗人差异有统计学意义(P>0.05)。本研究糖尿病组C等位基因频率与伊朗糖尿病组比较,差异无统计学意义(p>0.05)。
结论:
1 中国河北秦皇岛地区汉族T2DM组和对照组基因型和等位基因分布上差异无统计学意义,说明本地区人群CXCL5基因多态性可能不是糖尿病发病的危险因素。
2 对照组及T2DM组CXCL5变异基因携带者有较高的HOMAIR与BMI表明CXCL5基因突变与胰岛素抵抗及肥胖有关。
3 T2DM组按男性、女性分别进行基因型变异的临床特征分析得到相同的结果说明CXCL5基因突变与性别因素无关。