联合应用抗PD1/CD137单抗治疗小鼠卵巢癌及其机制研究

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卵巢癌是常见的妇科恶性疾病,其死亡率在妇科恶性肿瘤中排在第一位。卵巢癌中90%左右是上皮性卵巢癌。常规的治疗方法是手术、化疗或放疗,然而百分之七十的上皮性卵巢癌妇女会出现疾病进展和肿瘤向腹腔转移的现象。最常见的治疗策略是先手术切除,然后使用顺铂或铂的衍生药物进行化疗以清除不能通过手术清除的微小病灶。然而大多数病人在治疗后期会产生铂抵抗,最终复发并死亡。同时在治疗过程中给病人带来极大的痛苦,病人的生活质量很差。为了克服高复发率和减少病人的痛苦、提高生活质量,需要制定新的治疗策略以达到更好的治疗效果。随着肿瘤免疫学相关知识的不断发展,越来越多的肿瘤相关抗原被发现并对它们的功能进行了研究,人们开始针对这些肿瘤相关抗原对肿瘤病人进行免疫学治疗以清除微小病残留病灶。并在黑色素瘤和肾细胞癌的治疗中取得一定效果。免疫调节抗体是一类能够调节机体免疫系统的抗体,它能通过与T细胞表面的免疫共刺激受体以刺激T细胞的活化或与免疫共抑制受体结合来抑制T细胞的凋亡。现在研究较多的T细胞共刺激受体有CD28和CD137,共抑制受体有CTLA4,PD1,TIM-3,LAG-3等。现在这些受体的单克隆抗体已经用于多种肿瘤的治疗,并且在黑色素瘤和肾细胞癌的治疗中表现出很好的抗肿瘤效果。但应用免疫调节抗体治疗卵巢癌的研究还比较少,所以我们接下来的研究将主要围绕在应用这些抗体来刺激T细胞的功能以期达到较好的治疗效果。我们在本实验中利用主动免疫治疗方法对建立的ID8小鼠卵巢癌模型进行治疗研究。我们首先比较了抗CD137/PD1单克隆抗体与其它几种涉及几种其它免疫调节分子的单克隆抗体:(CD40、TIM-3、LAG-3)单独或两两组合使用的治疗效果。我们发现联合应用抗PD1/CD137单克隆抗体联合顺铂对ID8小鼠肿瘤的治疗效果最好,治疗组的平均生存期达到了90天。随后我们进一步研究分析其中的机制。我们通过流式细胞术检测了经过治疗的小鼠的脾细胞和腹腔免疫细胞的亚群比例变化,并检测了肿瘤特异性细胞毒淋巴细胞的溶细胞作用。结果我们发现这种联合抗CD137和PD1的治疗方法增加了CD8+效应T细胞的比例和绝对数,减少了免疫抑制Treg和MDSC的比例与绝对数,显著提高了CD8+T细胞对免疫抑制细胞的比例。而且这些CD8+T细胞的功能是激活的,由多克隆或肿瘤抗原特异性刺激产生大量的IFN-γ,并且表现出抗原特异性的细胞毒作用。
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