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[背景与目的]原发性肝细胞癌(primary hepatocellular carcinoma,HCC)是临床上最常见的恶性肿瘤之一,其发生、发展和转移与多种基因的突变、细胞信号传导通路和新生血管增生异常等密切相关。近十年,除基因突变之外,启动子区高甲基化所造成的抑癌基因在表观遗传学上的沉默,被认为是在肿瘤的发生过程中一个重要且可逆转的机制。本研究探讨在多种肿瘤组织中均有甲基化现象发生的受体型蛋白酪氨酸磷酸酶O(protein tyrosine phosphatase receptor type O,PTPRO)在肝癌及癌旁组织中表达程度的差异及其临床意义,以及hMLH1、DAPK及GSTP1的甲基化状态与临床病理参数及预后的关系。[方法]回顾性分析2000年1月至2005年12月在我院肝胆外科行手术治疗的病理诊断为原发性肝细胞癌的72例病例,并进行临床信息采集及随访。应用免疫组化二步法检测上述原发性肝细胞癌及癌旁组织中PTPRO蛋白的表达,分析其表达程度间的差异及其与临床病理参数间的关系；应用巢式甲基化特异性PCR检测hMLH1、DAPK及GSTP1的甲基化状态并分析其与临床病理参数间的关系。[结果]1.72例病例符合条件纳入分析。截至本次随访终点2009年6月1日,出现37例死亡事件,中位OS为48.3个月,中位PFS为26.3个月。临床分期为早期、病理分级为中高分化、无门脉癌栓、未侵及包膜、术后2年内未出现早期复发转移的肝癌预后较好(P<0.05)。而单个病灶、临床分期为早期、无门脉癌栓、未侵及包膜者具有相对较长的PFS (P<0.05)。性别、年龄、HBsAg、AFP值、病灶大小和肝硬化等因素对OS和PFS无明显影响(P>0.05)。多因素分析显示病理分级(P=0.000)、包膜侵犯(P=0.003)和2年内是否出现早期复发转移(P=0.000)是影响总生存时间的独立预后因素；临床分期(P=0.021)和病灶个数(P=0.045)是影响无进展生存时间的独立预后因素。2.截至本次随访终点2009年6月1日,47例患者出现术后复发转移(65.3%),其中早期复发转移(≤2年)33例(70.2%),晚期复发转移(>2年)14例(19.4%)。病理分级为低分化、伴门脉癌栓、复发转移时间为早期、高AFP水平(>400μg/L)的复发转移肝癌预后较差(P<0.05)。多因素分析显示病理分级(P=0.002)和复发转移时间(P=0.001)是影响复发转移患者总生存时间的独立预后因素；高AFP值(>200μg/L)是早期复发转移的高危因素(P=0.033),而伴首发症状者则更易出现晚期复发转移(P=0.033)。3. PTPRO蛋白在72例肝癌组织中仅1例呈阴性,阳性表达率为98.6%。其中高表达18例,占25.0%。72例癌旁组织PTPRO表达率为100%,其中高表达32例,占44.4%。PTPRO在肝癌组织中的表达程度明显低于癌旁组织(P=0.014)。45例伴有肝硬化和27例无肝硬化患者中的PTPRO高表达率分别为15.6%(7/45)和40.7%(11/27),伴有肝硬化患者的PTPRO表达量明显降低(P=0.017,x2=5.709)。单因素及多因素统计分析均未显示PTPRO与肝癌预后相关(P>0.05)。4. hMLH1、DAPK及GSTP1在65例肝癌组织中的甲基化率分别为75.4%、98.5%和71.4%。所有标本均存在甲基化现象,三者全部甲基化的比例为52.3%。临床早期(P=0.022)、AFP≤400ug/L(P=0.044)患者的hMLH1甲基化率要明显高于中晚期、AFP>400ug/L者；伴有首发症状患者的GSTP1甲基化率要低于无首发症状者(P=0.021)。hMLH1和GSTP1同时出现甲基化者的中位PFS要明显高于同时未甲基化者(P=0.034)。而hMLH1、DAPK及GSTP1三者同时出现甲基化者较只有一到二种出现甲基化者更不易伴发门脉癌栓。[结论]临床早期、中高分化、无早期复发转移、无门脉癌栓、未侵及包膜的肝癌预后较好。其中临床分期、早期复发转移、包膜侵犯是OS的独立预后因素；临床分期、病灶个数是PFS的独立预后因素。病理分级为低分化、伴门脉癌栓、复发转移时间为早期、高AFP水平(>400μg/L)的复发转移肝癌预后较差。病理分级和复发转移时间是影响复发转移患者总生存时间的独立预后因素。高AFP值(>200μg/L)是早期复发转移的高危因素,而伴首发症状者则更易出现晚期复发转移。PTPRO在肝癌组织中的表达明显低于癌旁组织；PTPRO的表达程度与肝硬化与否呈明显负相关,伴有肝硬化患者的PTPRO表达量降低。hMLH1甲基化与临床分期、AFP水平相关,临床早期、AFP≤400ug/L者的hMLH1甲基化率高。GSTP1甲基化与首发症状相关,无首发症状者GSTP1甲基化率高。hMLH1和GSTP1共甲基化的肝癌无进展生存时间较而二者均无甲基化者明显延长。低频甲基化组较高频甲基化组更易伴发门脉癌栓。