HIF-1诱导BNIP3在人胶质瘤A172细胞系中促凋亡作用的实验研究

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目的检测缺氧环境下人胶质瘤A172细胞系中HIF-1、BNIP3的表达及两者之间的关系,并探讨其对胶质瘤细胞的抑制增殖和促凋亡作用。方法1.培养人胶质母细胞瘤A172细胞系并制作缺氧箱模型,并将其随机分为A组(空白对照组)、B组(缺氧组)、C组(缺氧+HIF-1激动剂)、D组(缺氧+HIF-1激动剂+BNIP-3抑制剂)共4组,相差显微镜观察各组细胞在24h、48h、72h时间点的细胞形态学变化,MTT法检测各组细胞增殖抑制情况。2. Tunel荧光一步法检测各组A172细胞凋亡和增殖。3.运用细胞免疫组化方法检测各组细胞中HIF-1与BNIP-3的蛋白表达情况。结果1.相差显微镜观察:与A组比较,B、C、D三组细胞存活减少,增殖受到抑制,以B、C两组为著。MTT法:B、C、D组细胞增殖受到抑制,以B、C两组为著。2.Tunel荧光法检测:与A组相比,B、C两组细胞存活增殖差异有显著统计学意义(P<0.05);与B组比较,C组细胞存活增殖差异有统计学意义(P<0.05);与C组比较,D组细胞存活增殖差异有统计学意义(P<0.05);3.免疫组化检测:(1)蛋白HIF-1表达:与A组比较,B、C、D三组HIF-1的表达明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05);与B组比较,C、D两组中HIF-1的表达增高,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)蛋白BNIP-3表达:D组BNIP-3表达与B、C两组比较明显减少,差异有统计学意义(P<0.05),A、B、C、D四组各时间点BNIP-3表达与HIF-1表达呈正相关,具有统计学意义。结论1.人胶质瘤A172细胞系在缺氧环境下增殖可受到抑制,细胞发生凋亡;2.HIF-1在缺氧环境下表达增高,并可诱导BNIP-3的生成,两者呈正相关关系;3.HIF-1可诱导A172细胞发生凋亡,可能的机制可能与其诱导BNIP-3的生成有关。
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