波吉卵囊藻(Oocystis borgei)的无菌化培养及对弧菌作用的初步研究

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波吉卵囊藻(Oocystis borgei)是养殖中后期虾池常见的优势藻种,具有在对虾高位池分布广、种群稳定、适应能力强的特点,对养殖水质调控具有重要意义。本文研究了青霉素、链霉素、庆大霉素和卡那霉素对波吉卵囊藻生长的影响,采用四种方法添加抗生素获得了无菌藻株,比较了不同温度、照度及海水相对密度条件下无菌与自然带菌波吉卵囊藻生长的差异。以无菌波吉卵囊藻为材料,研究了沼泽红假单胞菌和枯草芽孢杆菌对波吉卵囊藻生长的影响,并初步研究了波吉卵囊藻及藻.菌体系对弧菌的作用,以期为虾池的生态防病技术提供理论基础。实验结果如下: 1、青霉素和链霉素对波吉卵囊藻生长均无显著性影响(P>0.05)。链霉素在1000IU/mL时,-μ相对于对照组降低了30%。 2、庆大霉素对波吉卵囊藻的生长影响极显著(P<0.01)。庆大霉素浓度为50~100IU/mL时,万与对照无显著性差异;浓度为500IU/mL时,-μ相对于对照组降低了30%。 3、卡那霉素对波吉卵囊藻的生长影响极显著(P<0.01)。卡那霉素浓度为50~100IU/mL时,-μ与对照无显著性差异;浓度为500 IU/mL时,-μ相对于对照组降低了30%。 4、微藻培养液中细菌对抗生素敏感性实验表明,除青霉素外,链霉素、庆大霉素和卡那霉素均对藻液中细菌有明显抑制作用。以链霉素、庆大霉素和卡那霉素为工具,采用依次和混合加入方法,均可获得无菌藻株。 5、在20℃时,无菌藻的比增长率(-μ)和叶绿素a(Chl a)含量分别为0.398/d和0.117mg/L,均显著高于带菌藻(p<0.05)。在28℃和35℃时,无菌藻和带菌藻生长无显著性差异(P>0.05),-μ和Chl a含量分别为0.360~0.454 d-1和0.089~0.134mg/L。 6、在照度为16μmol.m-Z.S-1时,无菌藻-μ和Chl a含量分别为0.345d-1和0.123mg/L,均显著高于带菌藻(p<0.05)。在照度为39μmol.m-2.S-1和881μmol.m-2.S-1条件下,无菌藻和带菌藻生长无显著性差异(p>0.05),-μ和Chl a含量分别为0.359~0.407 d-1和0.057~0.096mg/L。 7、在海水相对密度为1.007、1.020和1.030g/mL时,无菌藻和带菌藻的生长均无显著性差异(p>0.05),-μ和Chl a含量分别为0.325~0.374d-1和0.085~0.133mg/L。 8、沼泽红假单孢菌对波吉卵囊藻的生长有显著性影响(p<0.05)。当沼泽红假单孢菌密度为6×103~6×105cfu/mL时,-μ值最大,为0.445~0.457/d,Chla含量为0.077~0.107 mg/L。枯草芽孢杆菌对波吉卵囊藻的生长无显著性影响(p>0.05),-μ和Chla含量分别为0.336~0.340/d和0.071~0.111 mg/L。 9、无菌波吉卵囊藻对三株弧菌均无明显抑制作用。在无菌波吉卵囊藻中分别添加沼泽红假单孢菌和枯草芽孢杆菌发现,波吉卵囊藻.沼泽红假单孢菌体系对溶藻弧菌有明显抑制作用,波吉卵囊藻.枯草芽孢杆菌体系三株弧菌均无明显抑制作用。 10、带菌波吉卵囊藻对三株弧菌均有明显抑制作用。带菌波吉卵囊藻共栖细菌对三株弧菌均无明显抑制作用。在无菌波吉卵囊藻中回加带菌藻共栖细菌,藻-菌体系逐渐恢复对三株弧菌的抑制作用。
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