背景:硫酸软骨素(chondroitin su Lfate,CS)是一类广泛存在于人与动物结缔(软骨)组织中的糖胺聚糖,它主要是从动物喉骨、鼻中隔、气管等软骨组织分离纯化而得的一类酸性黏多糖,CS的结构是由D-葡糖醛酸与N-2酰-D氨基半乳糖酸硫酸酯组成。硫酸软骨素多作为保健品或药品用于人们的日常生活中,用于防治冠心病、心绞痛、心肌梗死、关节炎、角膜炎、耳聋耳鸣、神经痛等疾病,长期服用毒副作用较低,随着近几年的深入研究,发现硫酸软骨素还具有抗肿瘤的作用,具有多种重要生物活性。黑色素瘤是人类常见的一种疾病,它是发生率、死亡率增长速度最快的皮肤病癌症,一直以来都受到人们的广泛关注。化疗法对人体的伤害程度非常大,最根本的方法还是找到相关的基因从而达到治疗黑色素瘤的目的。已有研究证明海参中提取的糖胺聚糖具有抑制黑色素瘤增长的作用,它能够有效控制肿瘤的生长,从而达到治疗黑色素瘤的目的,硫酸软骨素作为糖胺聚糖的一种,本课题拟研究硫酸软骨素提高机体的免疫力作用机制以及控制黑色素瘤生长的作用机制。方法:1、体外培养小鼠脾脏细胞:通过硫酸软骨素进行刺激,从脾脏细胞数目,伽马干扰素水平来检测其免疫水平的变化。2、建立小鼠黑色素瘤模型:通过静脉注射硫酸软骨素,来观察小鼠脾脏细胞、肺浸润性淋巴细胞数目的变化,通过流式细胞术来检测小鼠脾脏细胞、肺浸润性淋巴细胞数目的变化。3、通过提取RNA进行测序:从基因的水平上鉴定硫酸软骨素对小鼠免疫力的影响以及对黑色素瘤模型小鼠的影响。结果:1、通过用硫酸软骨素对正常小鼠个体进行刺激,发现脾脏大小明显增大,在一定的浓度范围内脾脏细胞的数目随着浓度的增高而增加,血液中淋巴细胞百分率升高,这说明了硫酸软骨素具有一定的免疫增强作用。2、建立黑色素瘤模型小鼠,选取合适的硫酸软骨素浓度对黑色素瘤模型小鼠进行刺激,发现血液中淋巴细胞百分率的变化肿瘤组降低,肿瘤加药组升高且与空白对照组相近。通过细胞计数发现小鼠脾脏细胞、肺浸润性淋巴细胞数目均增长,肺部肿瘤个数减少,流式细胞仪分析小鼠脾脏细胞、肺浸润性淋巴细胞中CD8T细胞、CD4T细胞、NKT细胞均有不同程度的变化。3、通过高通量测序,对肿瘤组和肿瘤加药组小鼠脾脏细胞RNA进行测序,分析肿瘤组和肿瘤加药组处理组,发现二组中lnc RNA、m RNA关于细胞周期调控、细胞增殖、免疫调控方面的基因表达量存在差异,并且差异显著,这就为从根本上治愈黑色素瘤提供一定的理论依据。结论:硫酸软骨素能提高机体的免疫力,并且对黑色素瘤的治疗提供了理论依据,能够降低黑色素瘤的个数,从而为黑色素瘤的治疗、治愈提供可能。