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目的探讨喉癌中S100A9基因表达及其与S100A8的相互作用。材料和方法一、标本喉鳞状细胞癌标本来源于空军463医院耳鼻喉科患者,手术切取喉癌组织及距癌组织4-15毫米以上的癌旁正常组织。手术切取喉癌组织及癌旁组织均经病理诊断证实。所有喉癌病例均按1987年UICC喉癌分期标准进行诊断,所有患者术前均未接受放疗和化疗。肿瘤组织及癌旁组织切除后放入-70℃冰箱中保存。二、方法1、提取总RNA,反转录合成cDNA,利用半定量RT-PCR的方法以β-actin为内参,癌旁正常组织为对照,分析S100A9基因在喉鳞癌组织中的mRNA表达水平。2、石蜡包埋切片,脱蜡,癌旁正常组织为对照,免疫组织化学分析S100A9蛋白在喉鳞癌组织中分布及表达情况。3、Hep2细胞培养,收集对数生长期的细胞,提取DNA,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)获得S100A9全长基因序列并结合DNA测序、SNP分析检测S100A8和S100A9基因在喉鳞癌Hep2细胞系中的结构。结果1、53例病例中,有9例癌旁正常组织、5例肿瘤组织、4例转移组织中未见S100A9基因的表达;38例肿瘤与癌旁正常组织均表达的样本中,有28例癌组织S100A9基因mRNA表达高于癌旁正常组织,占74%(t=3。886,P＜0.001),有统计学意义。22例转移组织与癌旁正常组织均表达的样本中,有14例转移组织S100A9基因mRNA表达高于癌旁正常组织,占64%(t=2。957,P＜0.01),有统计学意义。2、免疫组化结果显示在40例人喉癌及癌旁正常组织标本中,在正常喉鳞状上皮及分化程度较高的喉癌细胞中可见棕色颗粒,主要分布于细胞质和细胞核,S100A9蛋白表达阳性,而分化程度较低的喉癌细胞中未见棕色颗粒,S100A9蛋白表达阴性。3、喉癌Hep2细胞系中S100A8和S100A9各区域未检测到序列异常。结论1、喉鳞癌及转移淋巴结中S100A9基因表达较正常癌旁组织中表达高,且与肿瘤的分化程度负相关,是喉癌发生发展的早期事件。2、首次证实喉鳞癌Hep2细胞系中S100A9和S100A8不存在相互作用。