鸡传染性支气管炎病毒Sczy3株细胞适应株的培育及其免疫效力的评价

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鸡传染性支气管炎(infectious bronchitis, IB)是鸡的一种急性高度接触性呼吸道传染病,由鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus, IBV)导致。该病毒具有高度变异性,血清型众多,且不同血清型之间仅有部分交叉反应甚至不存在交叉反应性。国内外主要采用弱毒疫苗接种对JB进行预防,但现有的传统疫苗对目前流行毒株仅能提供部分免疫保护。因此,为制定有效的免疫程序和为鸡群提供坚实的保护,应选择地方分离毒株或与流行毒株同一血清型毒株研制的疫苗。Sczy3是本实验室于2009年分离的一株LX4型的IBV毒株,利用鸡胚肾细胞(CEK)将其连续传至100代(C100)以致弱,希望制备出一株IB弱毒疫苗的候选株。试验结果显示:毒株在CEK细胞传代过程中,毒株能够高度适应CEK细胞,并能出现合胞体、空斑等典型病变。此后,将C]00代毒接种后非免疫雏鸡群未见临床发病症状,发病率和死亡率均为0%,这说明Sczy3毒株在CEK细胞连续传至C100代时已充分致弱。通过荧光定量PCR检测发现,不同代次的病毒在CEK细胞中CEK内增殖变化曲线呈单峰状,接毒后12-36h时是病毒增殖的高峰期,并于36h病毒滴度达到最高,但从接毒后36h至72h内病毒滴度则逐渐降低。在CEK细胞中大致传10代,Sczy3即可适应细胞,且病毒滴度逐渐升高,但在感染CEK细胞36h时,则呈现出早期代次的Sczy3病毒滴度要高于中、晚期代次的病毒滴度(病毒滴度:C20>C50>C90)。为评价Sczy3 C100对同源毒株及当前流行毒株的免疫保护效力。采用Sczy3C100、4/91和H120商品化疫苗分别接种7日龄的非免疫雏鸡,经二免后2周分别用Sczy3P3和SCTW分离株进行攻毒,统计各试验组鸡群抗体效价、攻毒后临诊症状、气管和肾脏的带毒情况等指标。结果显示:免疫组鸡群免疫后抗体效价均为阳性,Sczy3 C100对同源毒株可提供有效免疫保护;而对不同基因型毒株SCTW可提供一定临床保护,但鸡群气管和肾脏的病毒检出率稍高于Sczy3 P3攻毒组。目前我国有众多的IBV基因型流行,故而IBV新疫苗的研究任重道远。
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