壳寡糖诱导烟草抗烟草花叶病毒研究

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壳寡糖是一类氨基葡萄糖通过β-1,4键成苷而形成的2-10个单元的低聚糖。本文以聚合度(DP)为3-10的壳寡糖为材料,研究了对烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)的诱导抗病性。主要研究内容包括壳寡糖处理对症状表达的影响和一系列防御酶活性的变化。(1)壳寡糖(10μg/mL-200μg/mL)喷雾处理后,烟草植株对烟草花叶病毒表达强烈的系统诱导抗病性。接种叶和新生叶系统症状出现较晚,发病平均延迟3天,症状减轻,严重度级别平均减低3级。(2)壳寡糖(10μg/mL-200μg/mL)喷雾处理后,烟草叶肉细胞叶绿素含量比未喷药接种植株高24.0%-87.6%。此外,用壳寡糖处理健康烟草植株,叶绿素含量也有升高。(3)研究了壳寡糖诱导处理对烟草花叶病病情发展的影响。采用软件Curve Expert 1.3,建立了诱导植株单循环发病严重度增长的数学模型。结果表明,壳寡糖诱导后,烟草花叶病严重度符合Logistic模型:y=a/[1+b*exp(-cx)],(y为平均严重度,x为接种后时间)。利用软件MATLAB6.5对不同处理烟草花叶病严重度增长曲线进行分析,结果表明:以10μg/mL和50μg/mL壳寡糖诱导处理后,烟草花叶病严重度未达5级,100μg/mL至200μg/mL的各处理比未喷药接种处理延迟5.6d-7.7d;10μg/mL至200μg/mL壳寡糖诱导处理的病害严重度降低率在18.9%-55.6%之间;各处理的病情发展曲线下面积(AUDOC)比未喷药接种处理减小了41.4%-76.4%。这表明壳寡糖诱导有强烈的诱抗作用。(4)研究了壳寡糖诱导烟草对烟草花叶病毒抗病性的最佳处理浓度。依据发病严重度降低值和叶绿素增加值分别与处理浓度的关系,拟合了浓度――效应曲线。该曲线符合Hoerl模型,即y=a*bx*xc(y为发病严重度降低值或叶绿素含量增加值,x为处理浓度)。由模型得出壳寡糖诱导烟草最佳浓度施用范围在24μg/mL-25μg/mL之间,偏离最佳浓度,效果降低。这表明壳寡糖的作用与杀菌剂不同,处理浓度与效果之间并非线性关系。(5)在接种后不同时间测定了经壳寡糖处理后烟草植株内5种防御酶的活性。所测定的酶有过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)。
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