肿瘤预防与治疗的发展与新的疗效高的抗肿瘤药物的发现息息相关。随着化学， 生物学和分子生物学等学科的交叉相融，使人们不断发现更多的能够杀伤肿瘤细胞的化合物， 其中植物来源的天然产物越来越受到研究人员的重视。这些天然产物杀伤肿瘤细胞的途径有很多， 现在能够诱导肿瘤细胞凋亡的天然产物倍受重视。随着分子肿瘤学与分子药理学的发展， 人们对肿瘤的发生和发展也有了更多的了解。这些知识为肿瘤的治疗及新抗癌药物的研制与开发提供了研究的前言与靶点。本论文通过实验筛选出一种能够诱导肿瘤细胞凋亡的苝醌类的光敏化合物， 即竹红菌甲素。竹红菌甲素能够诱导人宫颈癌细胞（ He L a） 和人黑色素瘤细胞（ A 3 7 5 - S 2） 产生类似凋亡的形态变化， 可以清楚的看到形成凋亡小体， 并且诱导这两种肿瘤细胞的D N A 产生1 8 0 b p 倍增的DNA 断片， 因此可以说明竹红菌甲素能够诱导人宫颈癌细胞（ H e L a ）、人黑色素瘤细胞（ A3 7 5 - S 2 ） 以及小鼠实体瘤细胞（ S- 1 8 0） 和盲肠癌细胞（ H c e - 8 6 9 3） 等多种肿瘤细胞凋亡。本论文还进一步研究了竹红菌甲素诱导H e L a 细胞的分子机制， 研究了竹红菌甲素诱导H e L a 细胞的细胞凋亡相关因子（ B a x ，B c l - 2与P 5 3）m R N A 表达变化，及细胞周期变化相关因子（ P 5 3，P 2 1 与C y c l i n B 1 ）m R N A 表达变化及细胞周期变化的关系。实验结果发现Bax mRNA 表达水平随着HA 处理时间延长明显升高， 而Bcl-2mRNA 表达水平随着HA 处理时间延长明显降低。由于Bax 的激活能够诱导细胞凋亡， 而Bcl-2 的表达决定细胞的存活， 因此本实验可以进一步证实当细胞凋亡时，会出现Bax mRNA 表达升高和Bcl-2mRNA 表达降低； 以往研究表明P21 功能障碍导致细胞越过G1 期限制点，而激活的p53 主要功能是产生细胞周期抑制。RT-PCR 结果显示P53mRNA 表达升高，而P21mRNA 表达为先降低后升高， 并且流式细胞实验结果显示HeLa 细胞在一个细胞周<WP=64>吉林大学硕士学位论文 作者：陈洁56期时间内细胞主要积累在S 期。由于P53 与CyclinB1 表达是否正常直接决定细胞周期的变化，所以可以初步认为P53 mRNA 表达升高，而P21 mRNA 表达降低及CyclinB1 mRNA 表达降低导致了HeLa 细胞周期变化， 使大部分细胞积累在S-期无法进行正常的细胞周期运转， 因此导致了HeLa 细胞的凋亡。另外还考察了几种能够诱导肿瘤细胞凋亡的物质-竹红菌家素、5 氟尿嘧啶和吴茱萸碱与A 3 7 5 - S 2 细胞的周期变化及周期调控因子变化的关系， 结果发现用含有竹红菌家素、5 氟尿嘧啶和吴茱萸碱的培养液及不含小牛血清的培养液处理A 3 7 5 - S 2 细胞均能使A 3 7 5 - S 2 细胞周期发生变化， 细胞阻滞在S 期， 并且细胞周期调控因子C y c l i n B 1m R N A 表达随着处理时间延长而增加，这说明能够诱导细胞凋亡的物质能够使该细胞周期发生变化， 并且细胞周期变化伴随周期调控因子C y c l i n B 1 的变化， 因此我们初步认为周期因子C y c l i n B可以作为抗肿瘤药物筛选的靶点。