构巢曲霉细胞周期蛋白在无性生殖中的作用初步研究

来源 :华东理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangjiejin
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白色念珠球菌细胞周期蛋白Cln21和锌指蛋白Ume6是菌丝形态发育调控因子。Cln21和Ume6基因缺失后,在菌丝诱导条件下,白色念珠球菌细胞由丝状生长变为酵母状生长。但是模式菌株构巢曲霉中这些基因的功能并没有报道。构巢曲霉中Cln21和Ume6基因的缺失有可能影响菌体的发育过程。实验中构建了7株构巢曲霉缺失株:ΔUme1、ΔUme2、ΔUme3、ΔCIn1、ΔCln4、ΔCln5和ΔCln6。各个缺失株与野生株相比菌丝并未出现大的形态变化,但是随着培养温度的升高,ΔCln1、ΔCln4和ΔCln6菌株菌落由深绿色变为黄棕色。扫描电镜下观察发现,与野生株相比,ΔCln1、ΔCln4和ΔCln6菌株菌落表面分生孢子头数量少而分散。孢子计数发现,ΔCln1、ΔCln4、ΔCln5和ΔCln6菌株分生孢子产量都有不同程度的下降。在28℃,△Cln1、ΔCln4和ΔCln6菌株分生孢子产量分别为野生株的48.7%,68.6%和51.4%;在42℃下,ΔCln1、ΔCln4、ΔCln5和ΔCln6菌株分生孢子产量下降到野生株分生孢子产量的6.6%,10%,47.9%和4.8%。通过检测缺失株菌丝暴露于空气中不同时间后孢子生成特异性基因的mRNA水平发现,在菌丝暴露于空气中15h时,各个缺失株孢子生成特异性基因brlA、abaA、wetA,表达量远低于野生株,这是导致缺失株孢子头数目少而分散且发育不完全,最终使孢子总产量低于野生株的主要原因。同时我们也发现,细胞周期蛋白缺失株热休克蛋白编码基因Hsp30和Hsp70表达量与野生株相比波动较大。因此,构巢曲霉细胞周期蛋白编码基因Cln1、Cln4、Cln5和Cln6与菌体无性生殖过程中分生孢子的生成有关,这些基因的缺失使得菌体无性生殖能力减弱,且对温度的敏感增加,菌体对环境的适应能力减弱。
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