长江两种土著鱼类同工酶组织特异性研究及中华倒刺鲃基因组微卫星的筛选

来源 :华中师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangxiaofu2008
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中华倒刺鳃和岩原鲤是我国长江流域土著名贵经济鱼类,已成为我国淡水名优鱼类的重要养殖品种。为了保护两种土著鱼类的种质资源,我们从同工酶和微卫星DNA标记两个方面进行了探讨。首先运用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳技术,对中华倒刺鳃和岩原鲤的脑、眼、心、肝、肾、肌肉等6种组织的乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)及酯酶(EST)3种同工酶进行了初步的研究,对这3种酶在各组织中的同工酶位点及酶谱的表型进行了分析。结果表明,中华倒刺鳃和岩原鲤的3种同工酶系统具有组织特异性。中华倒刺鲃的同工酶结果显示LDH检测到经典的五条谱带,由3个基因位点编码,C位点仅在肝脏组织中表达;MDH在5种组织(除肌肉外)中检测到三条酶带,仅为s-MDH,肌肉组织中同时表达了s-MDH和m-MDH: EST至少由5个基因位点编码,同工酶酶谱复杂,肝和肾的活性较强。岩原鲤的同工酶结果显示LDH检测到3个基因位点编码,C位点仅在肝脏组织中表达;s-MDH检测在6种组织中均有表达,其中肝脏和肾脏的活性表达较强,m-MDH检测在脑、心脏、肾脏和肌肉4种组织中均有表达;EST检测到5个基因位点编码,同工酶酶谱复杂,Est-2为6种组织的共有谱带,肝脏的活性较强。利用24对岩原鲤的微卫星引物,对中华倒刺鳃基因组进行了微卫星DNA标记的多态性分析。通过基因组的提取、PCR扩增以及凝胶电泳等分子操作技术,筛选出10对有效扩增的微卫星引物,其中4个微卫星位点具有高度多态性。每个位点的等位基因数从6到10不等,大小在11lbp~258bp之间,观测杂合度在0.750-0.833之间,位点平均观测杂合度为0.771,期望杂合度在0.688-0.837之间,位点平均期望杂合度为0.786,平均PIC值为0.726。4个多态性位点皆符合哈代温伯格平衡。
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