内皮抑素基因非病毒载体肌肉注射联合电脉冲体内转染的研究

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目的:提高非病毒载体内皮抑素基因在体内的转染效率,使其在血清中持续高水平表达。方法:应用内皮抑素基因非病毒载体质粒 DNA(pMGh-Endo,含 SV40启动子及内皮抑素分泌片段)小鼠腓肠肌肌肉注射结合电脉冲方法进行基因体内转染,对照组为单纯肌肉注射,同时试验磷酸钠溶液及生理盐水不同类型溶液以及 DNA 降解抑制剂 aurintricarboxylic acid(ATA)对基因转染效率的影响。注射后第 7,14,28,35 天分别留取血清标本,检测其中内皮抑素含量,观察其体内内皮抑素基因转染效率及表达水平.结果:内皮抑素基因非病毒载体肌肉注射联合电脉冲刺激,可使基因体内转染效率提高 50 倍以上,血清内皮抑素水平维持较高浓度,持续五周血清内皮抑素水平无明显下降.质粒DNA溶于磷酸钠溶液较生理盐水溶液基因转染效率高,ATA 加入磷酸钠溶液溶解的质粒 DNA 中未能提高基因体内转染率。结论:内皮抑素基因非病毒载体肌肉注射联合电脉冲可明显提高基因体内转染效率,为临床肿瘤基因治疗提供了新的思路及方法。
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