HPLC-ESI-MS~n快速鉴定植物中活性成分

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液相色谱联用及电喷雾多级串联质谱技术(HPLC-ESI-MSn)综合了色谱的强大分离性能和质谱的优越定性功能,同时具备灵敏度高、分析快捷等优点,即使在样品稀少的情况下也能进行有效的分析,再与已知化合物的常规裂解规律进行比对,便能够快速识别已知化合物,获得未知化合物的丰富的结构信息,现己成为了对药用植物进行快速分析鉴定的最佳工具。本论文运用这一技术,成功地对中药小春花全株Botrychium ternatum)、杭白菊花序(Chrysanthemum morifolium Ramat)和佛手中药饮片(Citrus medica L. var. sarcodactylis Swingle)这三种不同类型植物的不同部位进行了液质联用分析,分别根据它们的电喷雾质谱多级碎裂行为识别并鉴定出了这三种药用植物中活性成分的化学结构。本论文的主要内容包括以下三部分。第一部分。对液相色谱及电喷雾多级质谱联用技术的应用进行了探讨并归纳了黄酮及黄酮苷的特征性裂解行为。在此基础上运用液质联用技术并参考文献资料,对中草药小春花进行了液质联用分析,根据电喷雾质谱的多级裂解数据及文献资料,快速地推理并鉴定了小春花中的28个黄酮及黄酮苷的化学结构。两个黄酮苷元分别为为山奈酚(kaempferol)和槲皮素(quercetin),涉及的取代糖基有葡萄糖(glucose)、甘露糖(mannose)、鼠李糖(rhamnose)、木糖(xylose)、乙酰化葡萄糖(icetylglucose)和香豆酰基葡萄糖(coumaroylglucose),其中有6个黄酮苷是之前传统的分离纯化方法没有分析得到的新化合物。第二部分。现代医药研究中,对天然植物的活性成分的提取、样品的制备,即提取条件的选用是极为重要的。因此,在本章节的研究中,我们选用了当今比较热门的微波辅助离子液法来选择性萃取杭白菊中的黄酮苷。并采用响应面优化法对微波辅助-离子液萃取法的提取时间、固液比、离子液浓度及微波功率这四个提取条件进行优化,以最少的实验操作,得到最优化的实验结果。最后,再采用高效液相质谱及电喷雾多级质谱联用技术对目标提取物进行快速地分离分析鉴定。我们采用此方法一共从杭白菊花序中提取到了十个黄酮苷,分别是金合欢素(acacetin)、山奈素(kaemferide)、芹菜素(apigenin)和木犀草素(lutedin)与芸香糖(rutinose)、葡萄糖(glucose)、葡萄糖醛酸(glucuronic acid)和新橙皮糖(neohesperidose)形成的氧取代的黄酮糖苷,证明了微波辅助-离子液萃取法及响应面优化方法的可行性与优势。第三部分。尝试建立快速检测佛手中非挥发性成分的化学结构,进一步了解佛手药效的化学物质基础,采用了高效液相色谱法及电喷雾串联质谱法研究了药用植物金佛手的有效成分,根据多级质谱碎裂行为及保留时间,鉴定出了一部分香豆素类化合物和黄酮化合物。此外本论文还简要介绍了液相色谱及电喷雾多级质谱联用技术的工作原理,以及该技术在药用植物研究中的进展。
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