郫县豆瓣中黄曲霉毒素B1在线监测技术研究

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郫县豆瓣是川菜中重要的调味品之一,是人们每餐必食的佐料,也是我市传统农产品加工的支柱性产业。现有的国家标准已经规定了某些产品的黄曲霉毒素检测方法,但是在黄曲霉毒素检测中,样品前处理非常重要,所以成品的检测方法还不能直接应用于原材料和半成品豆瓣。本文首先分析比较了薄层层析法、酶联免疫吸附法和高效液相色谱法三种方法检测黄曲霉毒素B1的操作可靠性、检测时间、检测成本等,酶联免疫吸附法从方法的可操作性、经济成本及企业适用性等各方面优于薄层层析法和高效液相色谱法。最终确定采用酶联免疫吸附法研究郫县豆瓣生产过程中各阶段产品黄曲霉毒素B1的在线检测技术。采用酶联免疫吸附法研究从原材料到生产过程中各个环节的半成品豆瓣直至终产品中黄曲霉毒素B1的最佳检测条件。首先确定酶联免疫试剂盒检测黄曲霉毒素B1的可靠性,结果显示:该酶联免疫试剂盒分析方法的线性范围为0.1~8.0ng/ml,检测灵敏度达到0.1ng/ml,批内和批间的变异系数均小于5%,0.1~8.0ng/ml线性范围内的平均加标回收率为97.88%。从结果可以得,该酶联免疫试剂盒在黄曲霉毒素B1含量检测方面灵敏度高,可操作性强。然后建立了不同样品材料的前处理方法,分析不同原材料采用酶联免疫法检测黄曲霉毒素B1的条件。文中主要考查了提取液种类和用量、提取方法和时间等因素,通过响应面设计软件获得黄曲霉毒素B1的最佳提取条件。实验表明,郫县豆瓣原材料蚕豆中黄曲霉毒素B1的最佳提取条件:甲醇浓度43.41%,料液比1:5.35,超声波提取时间39.89min,黄曲霉毒素B1值达到最大,为1.50μg/kg;成曲蚕豆瓣子中黄曲霉毒素B1的最佳提取条件:甲醇浓度39.66%,超声波提取时间27.70min,超声波提取功率88.97W,黄曲霉毒素B1值达到最大,为1.47μg/kg;辣椒醅中黄曲霉毒素B1的最佳提取条件:甲醇浓度43.01%,料液比1:6.34,超声波提取时间40.99min,黄曲霉毒素B1值达到最大,为1.32μg/kg;成品豆瓣中黄曲霉毒素B1的最佳提取条件:甲醇浓度60.80%,料液比1:6.24,超声波提取时间20.70min,黄曲霉毒素B1值达到最大,为3.22μg/kg。所研究的样品中黄曲霉毒素B1的含量均在1~3.5μg/kg,都达到了最佳提取效率;实验所选模型均显著,决定系数均大于0.94,说明结果能很好地预测其响应值,变异系数均低于5%,说明实验精确度高、可靠性强;得出的检测方法安全适用,检测效率高。
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