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子宫颈癌的发病率居全球妇女恶性肿瘤的第二位,在我国是女性生殖道最常见的恶性肿瘤。尽管宫颈癌的形成需要经历漫长的癌前病变过程,然而一旦进展为癌,即使在早期仍有相当多的患者发生侵袭转移,造成患者生存期下降及死亡。血管新生贯穿肿瘤发生发展的大部分过程,研究表明血管新生是宫颈癌患者一个独立的预后因素。因此,寻找与宫颈癌新生血管形成及癌症发展过程中的相关调控因素是非常必要的。巨噬细胞移动抑制因子(Macrophage migration inhibitory factor, MIF)是一种能抑制巨噬细胞随机移动的细胞因子,具有酶活性、参与淋巴免疫、内分泌调控及促炎作用等多种生物学功能,参与机体免疫及炎症反应,在正常人体血清内呈低水平表达。近年来研究发现MIF在细胞增殖分化、血管生成、肿瘤侵袭转移等过程中亦扮演重要角色,已在前列腺癌、肝癌、肺癌、乳腺癌、黑色素瘤等恶性肿瘤中观察到MIF的过度表达。MIF参与肿瘤发生发展的可能机制包括抑制肿瘤抑制基因p53的活性、抑制Rb基因功能、促进血管生成等。肿瘤浸润的淋巴细胞可分泌MIF促进基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及白介素-8(IL-8)的分泌,从而促进癌细胞的侵袭及转移。肿瘤源性MIF可增加血管内皮生长因子(VEGF)和IL-8的分泌,促进癌组织的血管新生及肿瘤生长。CD74是Ⅱ型跨膜糖蛋白,辅助MHCⅡ类分子完成外源性抗原的递呈,为MIF高亲和力受体。除在机体免疫反应中发挥作用,CD74在多种癌细胞中的表达上调,并显示其在肿瘤发生及血管生成中的重要作用。研究发现CD74是评价胰腺癌患者预后的一个有用指标。然而,有关CD74在肿瘤发生发展中的具体功能还需做大量研究工作。目前,有关MIF和CD74在宫颈癌发病过程中作用机制的研究尚不清楚。评估MIF及CD74在宫颈癌中的表达、定位及两者对宫颈癌血管新生、细胞增殖等方面的生物学作用；探讨两者在宫颈癌血管新生及发生发展中的作用,为宫颈癌的治疗寻找一个新的靶点提供实验依据。目的：探讨MIF及CD74在宫颈鳞癌的表达及两者对宫颈癌细胞株血管新生、增殖、侵袭等生物学作用的影响。方法：应用免疫组织化学法检测人正常宫颈、宫颈上皮内瘤样病变(cervial intraepithelial neoplastic lesions, CINs)及宫颈鳞状细胞癌(cervical squamous cell carcinoma, SCC)组织中MIF及CD74蛋白的表达情况并分析其与宫颈癌临床病理因素之间的相关性：应用CD34蛋白染色计算各宫颈组织的微血管密度(microvessel density, MVD),评估宫颈癌组织中MVD与MIF和CD74表达的关系：应用RT-PCR及Western blot法检测新鲜宫颈癌、癌旁正常宫颈组织标本及宫颈鳞癌细胞SiHa和C-33A中MIF及CD74mRNA和蛋白水平的表达；免疫细胞化学方法检测SiHa和C-33A细胞中MIF及CD74表达；RT-PCR、ELISA及CCK-8法检测人重组MIF(rhMIF)、MIF特异性抑制剂ISO-1和抗-CD74单克隆抗体处理的SiHa和C-33A细胞中VEGF及IL-8 mRNA的表达及蛋白的分泌情况及对细胞增殖影响的分析；细胞划痕法及Boyden小室检测rhMIF和抗-CD74单抗对SiHa细胞迁移及侵袭能力的影响。结果：1、MIF及CD74蛋白表达率均随宫颈病变的逐渐加重而升高。两者主要表达于宫颈上皮细胞的细胞浆中,偶可见细胞核及细胞膜表面的表达；MIF与宫颈癌间质浸润深度相关(χ2test, P=0.023),未发现CD74与宫颈癌任何临床病理特征存在相关性。2、应用CD34染色可清晰标记血管内皮细胞,MVD随宫颈病变的加重而逐渐增加,各组间MVD计数存在显著差别,宫颈癌组织中MVD最高；相关分析表明在宫颈癌组织中MIF与CD74蛋白、MIF/CD74的表达均与MVD呈正相关关系。3、新鲜宫颈癌组织中MIF及CD74 mRNA和蛋白水平均高于癌旁正常宫颈组织；宫颈鳞癌细胞株SiHa及C-33A中亦同样检测到MIF及CD74 mRNA和蛋白的表达。4、免疫细胞化学方法检测到SiHa及C-33A细胞表达MIF及CD74蛋白,主要定位于细胞浆中,同时可见细胞膜的表达。5、应用CCK-8法检测rhMIF处理后细胞的增殖能力增强,且呈时间-剂量依赖性。而应用抗CD74单克隆抗体处理后可部分抑制MIF促进细胞增殖的作用。6、rhMIF处理SiHa及C-33A细胞可增加上清液中促血管生成因子VEGF及IL-8的分泌,且呈剂量依赖性上升；ISO-1及抗CD74单克隆抗体预先处理,则可部分抑制MIF对细胞分泌VEGF及IL-8的促进作用。7、外源性MIF可增强SiHa细胞的体外迁移及侵袭力,而CD74并未参与MIF的促宫颈癌细胞恶性迁移、侵袭过程。结论：1.MIF与CD74的表达随宫颈病变加重而逐渐升高,癌组织中MIF及CD74的mRNA及蛋白水平显著高于癌旁正常组织,提示MIF及CD74参与宫颈鳞癌发生发展过程。2.MIF与CD74的表达与宫颈鳞癌组织的MVD密切相关；MIF可促进宫颈癌细胞分泌VEGF和IL-8,抗-CD74单抗部分抑制MIF诱导的血管生成因子的表达及分泌,说明两者共同促进宫颈鳞癌的血管生成。3.MIF通过与CD74结合,以时间-剂量依赖性方式促进宫颈癌细胞的增殖。4.MIF能增强宫颈癌SiHa细胞的迁移速度及侵袭能力。