胎盘滋养细胞自噬与前置胎盘合并胎盘植入的相关性研究

来源 :暨南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jeremy008
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研究目的目前已有文献报道自噬在细胞侵袭(尤其是肿瘤细胞)和妊娠中的作用,而LC3、Beclin1以及P62是自噬研究中常用的标志物。前置胎盘合并胎盘植入的发生与滋养细胞侵袭异常密切相关,本课题通过检测上述三种蛋白及基因在前置胎盘合并胎盘植入的表达水平来探讨胎盘滋养细胞自噬在前置胎盘合并胎盘植入中的表达水平及其相关性。研究方法收集2018年4月至2020年1月在我院定期产检的前置胎盘合并胎盘植入孕妇和正常妊娠孕妇的胎盘组织,各20例。本课题通过免疫组织化学法、实时荧光定量聚合酶链式反应法(qRT-PCR)、蛋白印迹(Western Blot)检测自噬相关蛋白LC3、Beclin1及P62的表达水平,透射电镜下观察胎盘滋养细胞中自噬小体的形成,探讨胎盘滋养细胞自噬与前置胎盘并胎盘植入的相关性。结果1.一般情况:两组的年龄、孕次、产次、人工流产史、剖宫产史均无明显差异(P>0.05)。2.免疫组织化学法:前置胎盘合并胎盘植入组的胎盘组织中所测得LC3、Beclin1以及P62的平均光密度(average optical density,AOD)分别为0.028±0.019、0.030±0.025、0.0033±0.0042,正常组中上述三种蛋白的AOD分别为0.012±0.007、0.011±0.006、0.0131±0.0112,三种蛋白在两组间的表达差异均有统计学意义(P<0.05)。3.qRT-PCR:LC3 mRNA和Beclin1 mRNA在前置胎盘合并胎盘植入组胎盘组织中的表达分别为4.657±3.784、2.183±1.668,正常组中两种基因的表达分别为1.800±0.993、1.832±1.810。两组间LC3mRNA的表达差异具有统计学意义(P<0.05),Beclin1mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05)。4.Western Blot:前置胎盘合并胎盘植入组的胎盘组织中LC3-II、Beclin1以及P62蛋白的表达分别为1.444±0.224、0.750±0.418、0.797±0.210,正常组中两种蛋白的表达分别为0.838±0.046、0.174±0.061、1.078±0.153。两组间LC3-II、Beclin1及P62的表达差异均有统计学意义(P<0.05)。5.透射电镜:前置胎盘合并胎盘植入组的胎盘组织所计自噬空泡占细胞质面积的比例为0.033±0.003,正常组中自噬空泡占比为0.009±0.010,两组间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论在前置胎盘合并胎盘植入患者胎盘滋养层细胞中自噬相关蛋白LC3、Beclin1的表达上调,P62的表达下降,自噬小体形成增加,表明其自噬活性增强,提示前置胎盘合并胎盘植入的发生与自噬活性增强具有相关性。
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