龙眼花芽成花逆转的差异蛋白分析

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 8次 | 上传用户:sjh_qj
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龙眼是我国南方的特产水果之一,在内销和外贸上历来有着重要的地位,在龙眼生产上,大小年结果问题是影响产量的主要原因,小年产量往往不及大年产量的一半,而龙眼花芽成花逆转又被认为是造成龙眼大小年结果的主要因素,因此,解决龙眼结果大小年问题,在生产上具有重要价值。本研究运用蛋白质组学方法和技术对龙眼成花逆转花芽蛋白质与正常成花花芽蛋白进行比较研究。主要研究结果概括如下:蛋白质的提取是影响检测蛋白质种类多少和双向电泳图谱质量的一个重要因素,本文比较了三氯乙酸/丙酮沉淀法(TCA)和酚抽法(Phe)两种方法对龙眼花芽蛋白的提取效果,结果表明:TCA法不能有效的提取龙眼花芽蛋白,而酚抽法得到的图谱背景干净,蛋白点清晰,说明酚抽法适用于龙眼花芽蛋白质的提取。通过比较龙眼正常成花和成花逆转花芽的2-DE图谱,共找出18个差异蛋白,其中有7个蛋白在成花逆转花芽中呈上调表达,11个蛋白下调表达。差异蛋白经胶内酶解和MALDI-TOF-TOF/MS分析,获得的PMF通过数据库检索,鉴定成功13个蛋白,鉴定成功率为72%。鉴定出的13个蛋白中,1个为未知蛋白,以一段基因序列命名,另外12个蛋白根据蛋白质的功能可以把他们划分为花粉育性相关蛋白(推断的无色花色素还原酶2、异黄酮还原酶和脱落胁迫成熟相关蛋白),抗氧化作用相关蛋白(B链Gdp甘露糖—3’,5’异构酶,推断的乳酸酰谷胱甘肽裂解酶和A链抗坏血酸过氧化物酶),光合作用相关蛋白(RuBisCo大亚基),调节蛋白(蛋白激酶、20s蛋白酶体α亚基6、蛋白酶体α亚基7和生长素诱导蛋白),分子伴侣(蛋白质二硫键异构酶)。通过对这些差异蛋白在成花过程中的功能分析,表明这些蛋白在龙眼成花逆转过程中的差异表达可能影响了花芽的正常发育,进而导致了龙眼成花逆转。
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