界面表面形态与成分因素对MC3T3--E1细胞粘附行为的影响

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[摘要]:大量研究显示生物材料的表面形态和生物学性能对细胞的粘附行为有调节作用。本研究通过四种不同的表面形态和生物学性能的界面来探讨其对MC3T3-E1细胞的粘附和增殖的影响。实验中制备了电纺PLGA表面作为含有一定孔隙的多孔粗糙物理界面。多巴胺和一型胶原分别在光滑玻璃片的表面形成涂层,作为两种不同的生物活性分子界面,胶原改性的电纺PLGA表面作为物理形态以及生物活性分子共同复合的界面;未做任何处理的玻璃片作为对照。本实验将MC3T3-E1细胞接种到四种界面上,使用扫描电子显微镜(Fieldemission scanning electron microscope, FESEM)和共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscope, CLSM)进行表征,以CCK-8检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期。以整合素β1作为粘附指标,对其进行免疫荧光染色以及采用western blot和实时定量PCR(RT-PCR)定量检测整合素β1的表达情况。以整合素α1,α2, α5, α10和all为检测指标,采用RT-PCR定量检测不同界面对特定整合素表达的影响。电镜结果显示,MC3T3-E1细胞在电纺,电纺胶原以及胶原界面上粘附良好。共聚焦结果显示无血清情况下,生物活性分子对细胞的粘附有明显的促进作用,界面的形貌作用影响较小。有血清培养下,形貌在粘附早期已经开始影响细胞整合素的表达促进细胞粘附,生物活性成分的影响较形貌为晚。生物特殊形貌与特定成分(胶原)结合作用比单一影响因素更为明显。
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