【引言】肝细胞肝癌是一种恶性程度很高的消化系统肿瘤，临床治疗主要采用以手术为主的综合治疗方式。TRAIL 是肿瘤坏死因子家族新成员，它可特异性诱导多种肿瘤细胞的凋亡，而对正常细胞发生凋亡赦免。随后的研究发现，TRAIL 是通过其特异性受体起作用的。DR4、DR5 为死亡受体，可传递死亡信号，诱导细胞的凋亡；DcR1、DcR2 为诱骗受体，因其胞内区缺乏“死亡结构域”(Death Domain)或不完整，信息无法传递，只能竞争结合配体，起到保护作用。普遍观点认为 TRAIL的作用机制与各受体的差异分布有关。许多研究表明诱骗受体只存在于正常组织，肿瘤细胞没有分布。但近来也有研究者提出不同意见，在肿瘤组织中发现了诱骗受体的存在，同时，TRAIL 仍可发挥作用。认为 TRAIL 的特异诱导作用不单纯由受体的分布差异决定。 【目的】研究 TRAIL 各受体在肝癌和癌旁组织的差异性表达，确定死亡受体、诱骗受体的表达与 TRAIL 的作用关系，探讨 TRAIL 应用于临床肝癌治疗的可能性。 【方法】 (1) 收集组织标本，应用 RT—PCR 方法检测肝癌和癌旁组织中 TRAIL-R1、R2、R3、R4 受体的 mRNA 表达。 (2) 免疫组化方法，应用单克隆抗体检测受体在蛋白水平的表达。 (3) 应用纯化的 TRAIL 蛋白，与肝癌细胞相作用，流式细胞仪分析结果，初步了解 TRAIL 作用于肝癌治疗的可能性。 【结果】 1．应用RT-PCR方法，发现肝癌和癌旁均有 DR4、DR5 的表达；而 DcR1、DcR2在癌旁肝组织和正常肝中虽也都有表达，但在肝癌中有明显表达差异。二者在肝癌和癌旁的阳性表达率分别为 (67.86％和100％，78.57％和100％)学位论文htIL受体在人肝细胞肝癌中的表达及htAIL诱导肝癌细胞凋亡研究2．免疫组化方法得出的结果，DR4、DRS仍在肝癌和癌旁都有表达，但D。RI、 DCRZ的结果与 RTPCR有所不同，为O2．31％和 96．31％，53．85％和 100％）3．纯化的TRAIL可以诱导肝癌细胞的凋亡，但作用有限；在Y一干扰素的联合 作用下，作用显著加强。 【讨论】 应用RT－PCR和免疫组织化学方法，本研究证实了死亡受体DR4、DRS在肝癌和癌旁组织中的广泛存在，其蛋白产物主要存在于细胞的胞浆；在诱骗受体Dd、DCRZ的表达检测中，确实发现多例肝癌组织不表达，免疫组化结果也可观察到明显的分界。但与传统观点不同的是，本实验表明诱骗受体并不是仅仅表达于正常和癌旁肝组织，在肝细胞肝癌中，诱骗受体也有较高的表达，ma 42．31兄 DCRZ53．85％）。与DCRZ 相卜，DCRI的表达偏低，PCR产物电泳的灰度值和兔疫组化的阳性结果明显较弱。对于肝组织来说，两种受体所起的保护作用中，DCRZ可能更大。 本实验证明了TRAIL的凋亡诱导作用，而且作用有剂量依赖性，随着TRAIL浓度的提高，诱导作用也增强。但与其它肿瘤细胞如JURKET细胞、黑色素瘤细胞、脑癌细胞相比，作用明显偏弱，且通过数据结果清晰的看到，Y干扰素可以明显增强＊si对肝癌细胞8义＊印1的凋亡诱导效果中＜0刀1人