目的本研究根据组织工程学的原理,体外培养兔骨髓间充质干细胞(Bonemesenchymal stem cells,BMSCs),进行软骨诱导后,以猪小肠粘膜下层(Smallinstestinal submucosa,SIS)为支架材料,制成软骨前体细胞—SIS复合物,体外复合培养,将软骨前体细胞—SIS复合物植入兔股骨髁最突出点全层软骨缺损处,用以修复关节软骨缺损。从形态学、组织学等方面对植入前的细胞—支架复合体和植入后对关节软骨缺损的修复进行观察和评估,探讨自体BMSCs软骨诱导后复合SIS支架材料对兔关节软骨全层缺损修复的效果,为组织工程方法修复关节软骨缺损的临床应用提供基础。方法(1)分别于实验组兔髂骨处抽取骨髓,体外培养BMSCs,传代至第三代,然后对BMSCs进行软骨诱导后8天,选取一部分细胞行细胞爬片,对细胞爬片进行CD34、CD44和Ⅱ型胶原免疫组织化学染色;(2)将诱导后的软骨前体细胞接种于猪小肠粘膜下层支架材料,复合48小时;(3)于36只兔股骨髁负重面造直径5mm全层软骨缺损模型,分为3组,每组24个关节,以经软骨诱导的BMSCs—小肠粘膜下层材料复合体对缺损进行修复,以同样面积的单纯小肠粘膜下层材料组对缺损进行修复以作为实验对照。第三组仅做全层软骨缺损模型作为空白对照组。术后4周、8周和12周分批取材,作如下检测:①大体观察;②HE染色组织学观察;③番红0染色;④Ⅱ型胶原免疫组化用以了解本研究对缺损的修复效果。结果大体观察和组织学检查显示细胞—支架组缺损基本修复,组织学检查显示修复组织为透明软骨及松质骨,而两对照组缺损修复不良,组织学检查显示主要为纤维性组织修复或无明显新生组织,软骨缺损明显存在。结论诱导后BMSCs在关节缺损内可继续向软骨细胞方向分化,可修复软骨缺损,恢复关节正常结构。