硫酸软骨素提取和纯化方法的研究

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硫酸软骨素是一种酸性粘多糖,通常以糖蛋白的形式存在于动物体内。硫酸软骨素是由氨基己糖和葡萄糖醛酸为基本结构单元构成的聚合体,分子量为1×104~5×104D。硫酸软骨素具有调节免疫和脂类代谢、预防感染和心血管疾病等多种生理作用,在医药、食品、化妆品等领域应用前景广泛。 论文以牛鼻软骨为原料,采用碱盐-酶解-醇沉法,以葡萄糖醛酸含量和硫酸软骨素得率为主要指标,主要研究了溶剂类型和浸提条件、酶制剂类型和酶解条件等因素对硫酸软骨素提取效果的影响。结果显示,采用2%(w/v)NaOH / 2%(w/v)NaCl(1:4,v/v)的混合液作为浸提液、料液比为1:12(w/v)、浸提温度为40℃、浸提时间为36h,酶解过程采用先胰酶作用后木瓜蛋白酶作用、其浓度比为0.100、硫酸软骨素浸提液固形物浓度为5%(w/v)、pH 分别为8.8 和6.8、酶解温度分别为54℃和40℃、酶解时间分别为10h和1h,醇沉体系的乙醇浓度为70%(v/v)、室温静置1h后离心(500r·min-1)5min,按以上方法和条件得到的硫酸软骨素提取物中,葡萄糖醛酸含量可达44.67%(w/w),硫酸软骨素得率为16.20%(w/w)。论文研究了乙醇沉淀法和离子交换树脂法纯化硫酸软骨素的效果。结果显示,离子交换树脂法纯化硫酸软骨素的效果较好。通过对树脂吸附和解吸性能、吸附等温线、吸附动力学曲线、解吸动力学曲线、动态吸附透过曲线和动态解吸曲线的分析得知,采用D218 型离子交换树脂、pH6.0 的NaCl 溶液溶解样品、pH8.0 的3.0mol·L-1 的NaCl溶液洗脱、洗脱速度为0.25BV·h-1 时,纯化物中葡萄糖醛酸含量为45.01%(w/w),较之原样提高了61.91%,硫酸软骨
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