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本文进行茶多酚(tea polyphonels,TP)脂质体的配方、制备工艺及体外透皮性能的研究,并将其用于慢性低剂量UvB辐射后的小鼠表皮细胞的促凋亡作用的研究。
本文以配方作为出发点,考察表面活性剂对TP脂质体的制备及性能的影响,同时优化实验条件,制备粒径小、透皮性能好的TP脂质体。分别选用吐温20(Tween 20)、司盘80(Span 80)和S-40作为修饰TP脂质体的表面活性剂,实验分别选用Tween 20和Span 80复配(组一),Tween20和S-40复配(组二)对TP脂质体进行修饰。
在组一中,用大豆卵磷脂制备的TP脂质体粒径及稳定性优于蛋黄卵磷脂制备的TP脂质体,因此选用大豆卵磷脂作为制备TP脂质体的脂质材料;在大豆卵磷脂用量为120mg,胆固醇为30mg, Span 80为20mg,Tween 20为20mg的配方下制备出的TP脂质体粒径较小,为247.2nm,且稳定性良好。采用自制franz扩散池进行体外透皮实验,实验表明:TP脂质体的透皮速率常数主要受表面活性剂中Span 80和Tween 20配比的影响。
在组二中,在卵磷脂用量240mg,胆固醇用量为60mg,S-40用量为60mg的条件下,制备TP脂质体过程中,当Tween 20用量为40mg和60mg时,制备出的TP脂质体粒径较小,分别为172.4nm和172.7nm。TP脂质体透皮速率常数主要受脂质体粒径的影响。
用脂质体包封TP的主要活性成分之一表没食子酸儿茶素没食子酸酯(EGCG),用以考察EGCG脂质体对中波紫外线辐射后BALB/C小鼠表皮细胞凋亡的影响。实验表明:EGCG脂质体对慢性低剂量UVB辐射后的小鼠表皮细胞的促凋亡作用效果较EGCG的丙酮溶液显著。
本文还采用高温微乳法制备TP脂质体。首先采用自制的相图检测装置研究了一种特殊微乳液体系的相图,确定其相行为,基于相行为制备了脂质纳米粒并成功负载了维生素E。本研究中的油相材料为单硬脂酸甘油酯(GMS)和油酸(OA),复配乳化剂为S-40和F-68。基于相行为研究制备了平均粒径为10nm左右的GMS纳米粒。在前述研究基础上,利用自制的实验室级80L制备装置成功实现了50L脂质纳米粒水分散体系的小试生产,为该技术的工业应用奠定了良好基础。同时,用该方法制备出最小粒径为12.1nm的TP脂质体,将该TP脂质体于4℃下储存,稳定性好。