FST对鸭胸骨与胸肌发育的影响及其调控机制研究

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卵泡抑素(FST)在骨和肌肉中均有表达,可通过自分泌及旁分泌的方式调控骨和肌肉的生长发育。FST作为两者均表达的分泌因子可能在这种协同发育中扮演重要角色,但缺乏相关的研究报道。因此,本研究在体外重组鸭FST蛋白,通过胸肌注射不同浓度的鸭FST重组蛋白建立实验模型,探究FST对鸭胸骨发育和胸肌发育在不同阶段的影响及其可能的调控机制。主要结果如下:(1)本研究通过构建原核表达载体成功表达了FST重组蛋白,纯化与鉴定结果显示,在50至75kd之间存在单一条带,且该重组蛋白活性为43.359U/L。(2)FST注射后,6周龄FST10组的屠宰率、全净膛率与FST100组的屠宰率均显著增加(P<0.05),7周龄FST50组的屠宰率与FST100组的全净膛率显著降低(P<0.05),9周龄FST10组的活重与日增重以及FST50组日增重和体斜长均显著增加,但FST10组和FST100组的屠宰率和全净膛率均显著降低(P<0.05)。(3)FST注射后,6周龄FST100组的胸肌重(率)增加(0.05<P<0.1)。7周龄与9周龄不同剂量FST组的胸肌重(率)略有下降。6周龄FST处理组的胸骨发育无明显变化,7周龄FST10组的胸骨重与胸骨面积降低(0.05<P<0.1),9周龄FST50组的胸骨面积和后侧突间距显著增加(P<0.05)。(4)胸肌与胸骨组织切片HE染色结果显示,与对照组相比,7周龄FST处理组的肌纤维直径与横截面积极显著降低(P<0.01),9周龄FST处理组的肌纤维直径与横截面积极显著增加(P<0.01)。7周龄FST处理组胸骨厚度与胸骨横截面积极显著降低(P<0.01),9周龄FST处理组胸骨厚度极显著增加(P<0.01),但骨小梁面积和单位面积内成骨细胞数量呈下降趋势(P>0.05)。(5)荧光定量PCR结果显示,7周龄时,FST处理组胸骨中COL10A1、VEGF表达量极显著上调(P<0.01),COL2A1和Runx2表达量极显著降低(P<0.01);胸肌中Pax7和MAFbx的表达量极显著上调(P<0.01)。9周龄时,FST处理组胸骨中ALP、COL1A2、CTSK、MMP9的表达量极显著降低(P<0.01);胸肌中Pax7、MyoD、mTOR和MurF的表达量呈增加趋势(P>0.05)。(6)FST处理后,7周龄与9周龄的胸骨与胸肌中TGF-β/ActA与PI3K/AKT通路相关基因表达量均存在显著变化,表明FST可能通过TGF-β/ActA与PI3K/AKT通路影响了胸骨与胸肌的发育。综上,FST对不同周龄鸭胸骨与胸肌发育的影响表现出周龄特异性和剂量差异效应,可能通过TGF-β/ActA与PI3K/AKT通路调控了鸭胸骨与胸肌的发育。
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