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目的:建立实验性自身免疫性心肌炎大鼠模型。经大鼠尾静脉注射内皮素B受体(endothelin B receptor,ETBR)过表达慢病毒干预自身免疫性心肌炎,观察ETBR过表达对自身免疫性心肌炎的影响。在此基础上,探讨ETBR过表达调控ICAM-1等T淋巴细胞归巢相关分子治疗自身免疫性心肌炎的相关机制。方法:制备ETBR基因过表达慢病毒。从购买的24只雄性Lewis大鼠中随机选出6只正常大鼠(NC组),剩余18只大鼠在第0天(免疫注射当天)及第7天分别注射猪心肌肌球蛋白,建立实验性自身免疫性心肌炎大鼠模型。初次注射心肌肌球蛋白的18只大鼠随机分为3组:实验性自身免疫性心肌炎组(EAM组),ETBR基因过表达慢病毒自身免疫性心肌炎组(ETBR-oe组)和空载慢病毒自身免疫性心肌炎对照组(GFP组)。ETBR-oe组大鼠在初次免疫当天,将1×10~8 TU慢病毒/只(200μL)注入大鼠尾静脉内,GFP组大鼠注入相同剂量的空载慢病毒,NC组和EAM组注入相同剂量的生理盐水。大鼠初次免疫后第21天,进行心脏超声心动图检测评价心功能变化;当天处死大鼠取血和心脏标本;ELISA检测血清BNP和AMA变化;心肌组织行HE染色;免疫组化检测ETBR、JAM-C、E-selectin和ICAM-1蛋白表达情况;荧光定量PCR检测ETBR、IFN-γ、IL-12、IL-17、IL-4、JAM-C、E-selectin、ICAM-1、MCP-1和MIP-1α的mRNA表达。Western blot检测大鼠心肌组织ETBR和ICAM-1的蛋白表达情况。结果:1、大鼠初次免疫后第21天,EAM组大鼠心脏LVEDd、LVEDs与NC组相比均增加(P<0.01),EF、FS与NC组比较均下降(P<0.01)。GFP组和EAM组比较EF、FS无明显差异(P>0.05)。ETBR-oe组与EAM组相比,LVEDd、LVEDs下降,而EF、FS明显升高(P<0.01)。2、HE染色示EAM组可见以淋巴细胞为主的大量炎性细胞浸润,心肌组织炎症评分明显高于NC组(P<0.05);GFP组心肌组织炎症评分与EAM组比较差异无统计学意义(P>0.05);与EAM组相比,ETBR-oe组心肌组织炎性细胞浸润明显减少,组织病理改变明显减轻,心肌组织炎症评分明显下降(P<0.05)。3、免疫组化示ETBR蛋白表达在EAM组心肌组织中的染色深度高于NC组,但ETBR-oe组又明显高于EAM组,GFP组与EAM组颜色深度无明显差异。ICAM-1在EAM组的心肌组织中染色深度明显高于NC组,与EAM组相比ETBR-oe组明显降低,GFP组与EAM组颜色深度无明显差异。JAM-C和E-selectin在EAM组、ETBR-oe组、GFP组三组中的染色均无明差异,但均高于正常对照组。4、ELISA检测示与正常对照组相比EAM组大鼠血清BNP和AMA相对水平在初次免疫后第21天明显升高(P<0.05);ETBR-oe组血清BNP和AMA相对水平,与EAM组相比明显降低(P<0.05);GFP组与EAM组比较,无明显差异(P>0.05)。5、荧光定量PCR检测结果显示,大鼠初次免疫后第21天,EAM组ETBR的mRNA与NC组比较有所增加(P<0.05),ETBR-oe组与EAM组比较mRNA表达显著升高(P<0.01)。EAM组大鼠心肌组织炎症因子IFN-γ、IL-12和IL-17的mRNA与正常对照组比较均表现为升高(P<0.01),ETBR-oe组与EAM组比较,IFN-γ、IL-12和IL-17的mRNA均明显下降(P<0.05)。EAM组大鼠心肌组织IL-4与正常对照组相比明显下降(P<0.05),ETBR-oe组与EAM组比较,IL-4的mRNA明显上升(P<0.01)。EAM组黏附分子JAM-C和E-selectin的mRNA表达水平明显高于正常对照组(P<0.05),EAM组、ETBR-oe组、GFP组三组心肌炎mRNA表达水平无明显差异(P>0.05);EAM组大鼠ICAM-1的mRNA表达水平明显高于正常对照组(P<0.05),ETBR-oe组与EAM组比较,ICAM-1的mRNA表达水平显著降低(P<0.05)。EAM组的趋化因子MCP-1和MIP-1α的mRNA表达水平明显高于正常对照组(P<0.05),EAM组、ETBR-oe组和GFP组三组心肌炎的mRNA表达水平无明显差异(P>0.05)。6、Western blot检测示,与NC组相比,EAM组大鼠ETBR的蛋白表达水平有所增高(P<0.05),ETBR-oe组与EAM组比较,ETBR的蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。EAM组大鼠ICAM-1的蛋白表达水平明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05),ETBR-oe组与EAM组比较,ICAM-1的蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论:1、猪心肌肌球蛋白免疫Lewis大鼠可以成功诱导出实验性自身免疫性心肌炎模型。2、在自身免疫性心肌炎中内皮素B受体过表达可以阻止T淋巴细胞归巢,减轻自身免疫性心肌炎病理损伤并改善心功能。3、内皮素B受体过表达阻止自身免疫性心肌炎T淋巴细胞归巢,主要机制可能与抑制ICAM-1等T淋巴细胞归巢相关分子的表达有关。