【摘 要】
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WUSCHEL—related homeobox(WOX)是植物特有的一类HB转录因子,它参与植物的多个生长发育进程。WUSCHEL(WUS)基因是WOX家族的一员。拟南芥的报道中认为WUS能促进植物再生。苹果的再生效率低进而导致苹果遗传转化效率低,这严重的干扰了苹果基因功能鉴定的进程。苹果中WUS的功能尚未有报道。本研究克隆了苹果MdWUS基因全长编码区序列,构建过表达载体,获得过量表达MdWU
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WUSCHEL—related homeobox(WOX)是植物特有的一类HB转录因子,它参与植物的多个生长发育进程。WUSCHEL(WUS)基因是WOX家族的一员。拟南芥的报道中认为WUS能促进植物再生。苹果的再生效率低进而导致苹果遗传转化效率低,这严重的干扰了苹果基因功能鉴定的进程。苹果中WUS的功能尚未有报道。本研究克隆了苹果MdWUS基因全长编码区序列,构建过表达载体,获得过量表达MdWUS基因的植株并对MdWUS基因功能进行鉴定。本研究的主要结果总结如下:1.通过应用PCR技术,成功地从GL-3苹果的cDNA中克隆出MdWUS基因的编码序列,序列全长为981 bp,编码326个氨基酸。与其他蔷薇科的WUS基因对比,它们都具有保守的HD结构域。进一步通过进化分析发现苹果中的MdWUS与蔷薇科梨中的WUS基因遗传进化关系最近。2.通过对‘寒富’与GL-3的时空表达分析发现,苹果中的MdWUS基因在茎尖与幼嫩叶片中的表达量较高,在根和果实中表达量较低。3.转录激活试验和亚细胞定位试验证明MdWUS是具有转录激活活性的核定位蛋白。4.构建了pRI-MdWUS过表达载体并通过农杆菌介导转化到GL-3苹果中,获得转基因株系4个,观察分析发现,过量表达MdWUS具有提高苹果叶片再生效率和促进芽分蘖与侧根形成的功能。
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