聚酰亚胺纳米纤维膜固定辣根过氧化物酶:碳纳米管与卟啉的影响及作用机制

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辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase, HRP)是使用最广泛的氧化还原酶之一。碳纳米管(MWCNTs)具有一定的电化学催化性质,在光电化学领域被广泛研究;卟啉作为血红素蛋白质的重要组成部分,也被广泛应用于电化学领域;两者都同样具有提升HRP催化活性的潜力。本论文的具体研究内容如下:选择4,4’-六氟异丙基-邻苯四酸二酐(6FDA)和二氨基二苯醚(ODA)为单体,合成可溶性聚酰亚胺(PI),利用静电纺丝法制备MWCNTs/PI复合纳米纤维膜。将HRP通过物理吸附的方式固定于MWCNTs/PI复合纤维膜表面,发现随着MWCNTs共混比例的提高,固定化酶活呈现先增大后减小趋势;当MWCNTs含量为5%时,固定化酶活由2.38%提升至12.50%。通过紫外可见吸收光谱分析,MWCNTs对HRP活性的提升是通过促进催化活性中间体"HRP I"转变为HRP完成的。合成二氨基卟啉,作为聚酰亚胺的共聚单体合成卟啉化聚酰亚胺(PPI),得到了重均分子量至少1.0×106的高卟啉含量的聚酰亚胺。将不同卟啉含量的聚酰亚胺以不同比例与MWCNTs共混,通过静电纺丝法制备MWCNTs/PPI纳米纤维膜。将HRP通过物理吸附的方式固定于MWCNTs/PPI复合纤维膜表面,发现随着表面卟啉含量的提高,固定化酶活呈现先增大后减小趋势;当卟啉含量为10.87mol%时,固定化酶活由2.38%提升至28.85%,相对于MWCNTs,卟啉更有利于HRP活性的提升。紫外可见吸收光谱和荧光光谱分析认为,它对HRP活性的提升是通过与HRP I产生相互作用而发生的。当卟啉碳纳米管共同引入聚酰亚胺固定化HRP保留活性最高达39.98%。最后改性四苯基卟啉为二氨基二磺酸基卟啉,合成了磺酸卟啉化聚酰亚胺。本论文重点研究了碳纳米管和卟啉对于HRP活性的影响和作用机制,对于HRP的应用研究具有重要意义。
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