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目的：采用反义核酸技术封闭survivin基因，探讨研究survivin反义寡核苷酸对人乳腺癌细胞系MCF-7的增殖及凋亡的影响，观察其对人乳腺癌细胞裸鼠移植瘤的治疗作用。方法：本实验共分三部分进行。第一部份分别以脂质体介导反义寡核苷酸、无义寡核苷酸及RPMI 1640培养液作为空白对照转染人乳腺癌MCF-7细胞系，采用Real time RT-PCR、western blot方法检测各组MCF—7细胞survivin蛋白及mRNA的表达情况，测定转染后细胞贴壁率变化，研究survivin反义寡核苷酸对MCF-7细胞的生长抑制作用。第二部份：用Hoechst 33258／PI双重染色观察MCF-7细胞的凋亡率，采用透射电镜观察细胞超微结构变化，应用流式细胞仪检测细胞周期的和细胞凋亡的变化，DNA凝胶电泳观察凋亡情况，进一步研究survivin反义寡核苷酸对MCF-7细胞的生长抑制效应。第三部份：建立人乳腺癌MCF-7细胞移植瘤模型，成瘤后随机分3组（每组5只）分别用Lip、ASODN／Lip、NODN／Lip进行瘤周及瘤体注射，每隔5天注射1次共3次。，观察肿瘤抑制率、体积和动物的体重的变化，用TUNEL法检测各组肿瘤细胞的凋亡率，透射电镜观察肿瘤细胞的超微结构改变，用western blot检测各组肿瘤的survivin蛋白表达情况。结果：1、脂质体介导survivin反义寡核苷酸转染人乳腺癌MCF-7细胞后，细胞内survivin蛋白及mRNA表达显著降低，通过real time RT—PCR检测MCF-7细胞经作用后其survivin mRNA起始拷贝数明显下降；同时细胞贴壁率降低达32.96％，细胞生长抑制率最高达73.60％，ASOND／Lip组与NODN／Lip组和Lip组差异有显著性（p＜0.05）。2、Hoechst 33258 PI染色观察转染后的细胞凋亡率达73.36％，其细胞凋亡指数（AI）增加，ASOND／Lip组与NODN／Lip组和Lip组相比差异有显著性（P＜0.05）。透射电镜观察可见转染后细胞超微结构呈凋亡样改变，3、流式细胞仪检测见转染后细胞凋亡显著增加，并出现G2／M期阻滞现象。4、成功建立裸鼠皮下移植瘤模型，ASODN几ip治疗组的肿瘤体积在治疗期内下降而NODN几lp组和Lip组体积增加，抑瘤率达70.10%，各组裸鼠体重无明显差别。TUNEL法检测AsoND/Lip组凋亡率为38.6%，与其它两组比较有显著性差异（P<0.05）。Westem blot检测As0DN几ip组肿瘤的survivin蛋白明显降低。结论:1、脂质体介导转染针对survivin mRNA的反义寡核普酸可在survivin蛋白及mRNA两个水平上有效地降低乳腺癌MCF一7细胞内survivin的表达，并能够有效抑制乳腺癌细胞的增殖活性，survivin可以作为乳腺癌治疗中具有重要作用的靶点。2、Survivin表达下调对乳腺癌细胞的生长抑制作用主要通过诱导细胞发生凋亡以及阻止有丝分裂的完成发生q从阻滞期而实现。3、Survivin反义寡核普酸可有效的抑制人乳腺癌裸鼠皮下肿瘤的生长速度，促进诱导肿瘤细胞的凋亡。4、单纯封闭survivin不能使实验动物肿瘤消失。