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邻苯二甲酸酯(phthalate acid esters,PAEs)是一类结构相似且广泛使用的化学物质，主要作用是软化塑料和增强塑料的弹性。邻苯二甲酸二丁酯(phthalic acid dibutyl ester,or dibutyl phthalate,DBP,)是PAEs中的主要成员之一，与其它PAEs不同，DBP已不再是主要的增塑剂，而主要作为乳胶胶粘剂的成份，同时还用于室内装璜材料、染料溶剂、化妆品及其它个人防护用品等。人类在工作和生活中有多种途径可以接触到DBP，如DBP的生产、以DBP为原料的产品制造、含有DBP材料的使用，以及环境中(包括水、食物和空气等)大量存在的DBP。DBP主要以其代谢产物的形式吸收进入体内，不在体内蓄积，一般情况下以与葡萄糖醛酸结合的形式在48h内经尿排出体外。 PAEs已被确认为环境内分泌干扰物(environmental endocrine disruptors,EEDs)之一，虽然还没有直接的证据表明DBP对人类生殖和发育的损害作用，但动物(主要是啮齿类动物)实验结果已经证明DBP能干扰正常的生殖系统功能。DBP对雄性动物生殖和发育的影响包括精子生成障碍、睾酮合成量下降以及胚胎畸形等，但其机制还不清楚。本研究从精子生成量及精子动力、睾丸标志酶、脂质过氧化、睾酮合成相关酶mRNA表达、睾丸细胞超微结构等方面探讨DBP对雄性生殖的影响，为接触人群早期生物学监测与评价提供参考指标。南京医科大学硕士学位论文第一部分邻苯二甲酸二丁醋对生精过程 及精子活率的影响 将6周龄雄性sn大鼠随机分成。、250、500、l000mg·kg一’二d一’4组，每组16只，灌胃给予DBP。分别于染毒2周和4周后，颈稚脱臼法各处死8只动物。观察动物一般情况、体重以及脏器系数的变化，。股动脉取血，迅速分离脏器，液氮速冻后一80℃保存备用。常规分离血清，一20℃保存备用。用计算机辅助精子分析系统(CASA)观察附争尾精子运动速度参数和精子运动方式参数的变化。用分光光度法测定血清和争九匀浆中超氧化物歧化酶(s OD)、谷耽甘肤过氧化物酶(GsHPx)、酸性磷酸酶(AcP)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、山梨醇脱氢酶(s DH)和葡萄糖一6一磷酸脱氢酶(G一6一PD)活力以及丙二醛(MDA)和还原型谷脱甘肤(GSH)含量。 结果显示，染毒2周和4周后，随着染毒剂量的增加体重增加量呈现明显的下降趋势，1000 mgkg一’·d一’剂量组与对照组相比均有显著性差异(p<0 .01)。肇丸脏器系数显著下降，1000mgkg一’·d一’剂量组与对照组相比均有显著性差异(p<0.01)。精子头计数(SPC)和每日精子生成量(SPR)呈现出单一的下降趋势，500 mgkg一’·d一’和1000 mgkg一’·d一’剂量组与对照组相比差异均有显著性(p<0.01)。染毒2周后，血清中GsHPx活性和争九匀浆中GSH水平下降趋势明显，而匀浆中GSHPx活性呈上升趋势，1000 mgkg一’·d一’组与对照组相比有显著性差异沙<0.05)。染毒4周后，血清中ALP活性呈现上升的趋势。血清和争丸匀浆中sDH活性受到明显抑制，1 000 mgkg一’·d一’组与对照组相比均有显著性差异勿<0.01)。争丸匀浆SOD活力降低，高剂量组与对照组相比差异有显著性勿<0.05)。血清GSH水平表现出上升趋南京医科大学硕士学位论文势，1000 mgkg一‘·d一’组与对照组比较有显著性差异(尸<0 .05)。精子曲线运动速度(vCL)随染毒剂量的增加呈下降趋势，高剂量组与对照组相比差异均有显著性沙<0.05)。 以上结果提示，肇丸是DBP毒作用的主要靶器官之一;DBP可引起大鼠争丸精子生成量和抗氧化能力的下降。关健词:部苯二甲酸二丁醋;SD大鼠;精子;计算机辅助精子分析;脂质过氧化;山梨醇脱氢酶;碱性磷酸酶;谷脱甘肤第二部分部苯二甲酸二丁醋对支持细胞 结构和功能的影响 将6周龄雄性sD大鼠随机分成。、250、500、1000 mg·kg一’·d一’4组，每组16只，灌胃给予DBP。分别于染毒2周和4周后，颈推脱臼法各处死8只动物。观察动物一般情况及体重的变化。股动脉取血，迅速分离脏器，液氮速冻后一80℃保存备用。常规分离血清，一20℃保存备用。放射免疫法测定血清卵泡刺激素(F SH)浓度。Trizol法提取肇九细胞，总RNA，逆转录聚合酶链反应(Rl二PCR)测定雄激素结合蛋白(ABP)和抑制素(I NH)mRNA的相对表达量。透射电子显微镜观察支持细胞的超微结构。 结果显示，染毒4周后，FSH表现出明显的上升趋势，250mgkg一’·d一’与1 000 mgkg一‘·d一’剂量组和对照组相比有显著性差异(p<0.05)。ABP mRNA和INH mRNA表达水平随着染毒剂量的增加呈现出明显的下降趋势，染毒2周后，500 mgkg一’·d一’与1000mgkg一’·d一’剂量组和对照组相比有显著性差异(尸<0.01);染毒4周后，ABP mRNA和INH mRNA表达水平随着染毒剂量的增加进一步下降，各剂量组与染毒2周相比都有降低，500 mgkg一’·d一’与1000 mg雌一‘·d一’剂量组和对照组相比有显著性差异(p<0.01)。南京医科大学硕士学位论文电镜观察显示，高剂量组支持细胞与生精细胞比例失调，胞浆中初级溶酶体增多，核高度崎形，线粒体轻度退行性变化，部分异染色质有边集现象，内质网增生、?