我国是世界上食用植物油最大的生产国和消费国,但我国大多数油菜品种的含油量偏低,培育高含油量的菜油籽已经成为我国油菜的育种目标。模式植物拟南芥与油菜同属十字花科植物,所以基于拟南芥的基因信息来研究含油量相关调控机制。可以为提高油菜含油量的遗传转化工作奠定基础。植物油脂主要积累在种子中,代谢过程有多个基因参与调控。溶血磷脂酸酰基转移酶(lysophosphatidic acid acyltransferase,LPAT)是三酰甘油合成过程中的一个关键酶,定位于内质网膜上,在油脂合成、种子发育及生物膜合成过程中有重要作用。磷胺霉素抑制抗性基因1(Resistant to Inhibition with Fosmidomycin 1,RIF1=NOA1)与质体代谢相关,参与蛋白参与油脂合成与代谢过程,与叶绿体核糖体功能有关。水孔蛋白通道(Aquaporins,AQPs)是水和中性小分子跨生物膜运输通道,其中液泡膜内在蛋白(tonoplast intrinsic proteins,TIPs)对于液泡相关生理活动,植物生长发育,特别是种子发育至关重要。油脂代谢的相关酶发挥催化作用,与其正确的亚细胞定位和蛋白构象密切相关。可溶性N-乙基马来亚胺敏感因子附着蛋白受体(soluble N-ethyl-maleimide sensitive factor attachment protein receptor,SNARE)蛋白通过形成SNARE复合体介导膜融合,参与细胞内膜泡转运,在植物胞质分裂,向重力作用,对生物及非生物胁迫的响应,植物激素信号转导等过程中发挥作用。蛋白相互作用是细胞生理活动的基础。本实验组前期工作筛选发现SNARE蛋白与胞质酶蛋白有相互作用,是否SNARE蛋白可以通过蛋白相互作用,参与调控油脂代谢过程,值得研究。因此,本研究利用基于杂交的酵母分裂泛素化蛋白互作检测系统(Mating Based Split-ubiquitin Assay,mbSUS)方法研究了含油量的关键酶基因RIF1、LPAT2及影响种子发育及水分运输的液泡水孔蛋白TIP是否与R-SNARE蛋白中的VAMP7家族蛋白存在直接相互作用。本研究发现了VAMP712、VAMP721与TIP2;1、TIP1;1、TIP1;2、LPAT2之间均有强的相互作用,VAMP723与TIP2;1、TIP1;1、TIP1;2之间具有相互作用,VAMP724与TIP1;1、LPAT2之间有相互作用,VAMP726与TIP3;1之间有相互作用。在进一步工作中,将其中重要互作结果通过比率型双分子荧光互补(ratiometric Bimolecular Fluorescence Complementation,rBiFC)进行验证。本研究有助于揭示膜转运对植物细胞体积增长、种子发育、油脂代谢的影响,可以为未来基于膜转运对这些蛋白的调控机制探索奠定基础,为日后培育高产油量的油菜品种提供一定的参考价值。