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目的:本研究通过三个有序的小实验,分阶段探讨中药“养肝合剂”对进行肝细胞移植的急性肝衰竭大鼠的影响。实验一:寻找更接近人类病毒性肝炎诱导的急性肝衰竭动物模型,运用生化检测和病理检查来证实模型的可靠性和稳定性;实验二:观察中药“养肝合剂”对体外培养肝细胞的影响;实验三:在急性肝衰竭鼠模型的基础上使用肝细胞移植合并中药“养肝合剂”治疗,探索急性肝衰竭新的治疗方法。欲通过本研究为临床上治疗急性肝衰竭提供一个全新的思路,探索肝细胞移植结合中医治疗急性肝衰竭的新途径。方法实验一:我们采用了TAA与内毒素不同剂量、不同组合方式诱导SD大鼠,构建急性肝衰竭的动物模型,对比组间生化检查及病理检查结果;实验二:运用肝细胞培养及血清药理学方法,比较基础培养液、当归+基础培养液及养肝合剂+基础培养液三种不同的培养液对肝细胞生长、增殖等状况的作用;实验三:将按实验一造模后的80只近交系大鼠随机分为三组一移植组、移植+中药组、对照组,比较组间存活率和各生化指标。结果:实验一:单纯二次TAA及第二次换用内毒素均可形成急性肝衰竭的动物模型。其中,首日注射3%TAA 300mg/kg次日注射内毒素5μg/kg的方式造成的急性肝衰竭模型稳定,存活窗口期达48h以上,便于治疗性研究的开展,是一种相对理想的动物模型。实验二:中药“养肝合剂”对体外培养肝细胞的附壁生长、增殖速度具有明显的促进作用,并显著延长了体外培养的生存时间,提示“养肝合剂”可能对肝细胞发挥作用具有促进作用,形成养肝护肝效应。实验三:实验表明肝细胞移植虽然不能明显减轻肝细胞损伤,但可明显补偿肝细胞的代谢功能,显著降低血清直接胆红素浓度、血氨浓度,提高血清白蛋白的水平,缩短凝血酶原时间,5天存活率大幅度提高。合用中药“养肝合剂”后,5天存活率更进一步提高,降总胆红素及血氨浓度,缩短凝血酶原时间更明显,而且还可显著降低血清ALT及AST水平,提示中药“养肝合剂”合并肝细胞移植对挽救急性肝衰竭受者生命具有明显的治疗价值。结论:我们通过以上三个实验,构建了相对理想的大鼠急性肝衰竭模型,求证了“养肝合剂”促进体外肝细胞生长的细胞生态学依据,初步证实了“养肝合剂”对肝细胞移植治疗急性肝衰竭的辅助和优化作用,为本课题的临床实验阶段打下基础。