论文部分内容阅读
目的：探讨神经生长导向因子slit2及其受体robol在大鼠皮层星形胶质细胞氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation, OGD)后及海马神经干细胞诱导分化过程中的表达变化及其意义。方法：体外分离培养乳大鼠皮层星形胶质细胞,建立OGD模型,并根据氧糖剥夺的时间不同将细胞分为OGD0h组(对照组)、2h组、4h组、6h组和12h组。相差显微镜观察各组的细胞形态,MTT法检测各组的细胞活力,RT-PCR法检测各组slit2mRNA和robol mRNA的相对表达情况。体外分离培养乳大鼠海马神经干细胞,诱导其分化,根据诱导分化的时间不同将其分为0d组(神经干细胞组)、1d组、2d组、3d组和7d组。免疫荧光染色鉴定神经干细胞及其诱导分化产生的神经元和星形胶质细胞,RT-PCR法检测各组细胞slit2mRNA和robol mRNA的相对表达情况。结果：1.星形胶质细胞氧糖剥夺后的对照组、OGD2h组、4h组、6h组和12h组的细胞活力(OD值)分别为(0.756±0.013),(0.681±0.016),(0.563±0.033),(0.404±0.024)和(0.222±0.026),细胞活力随着氧糖剥夺时间延长而下降,呈时间相关性(p<0.01)。2.氧糖剥夺后,统计结果显示不同组别星形胶质细胞slit2mlRNA和robol mRNA表达先逐渐升高,6h组达高峰(与对照组比,p<0.05),12h组明显下降(与6h组比,p<0.01)。3.从乳大鼠海马组织分离培养的神经干细胞具有自我增殖、自我更新能力,并能分化为神经元及星形胶质细胞,具有多分化潜能。4.神经干细胞诱导分化过程中各组细胞robol mRNA的表达量：①0d组、1d组、2d组之间两两比较,差异无统计学意义(p>0.05)②3d组分别与0d组、1d组、2d组相比,表达上调(p<0.05)③7d组分别与0d组、1d组、2d组相比,表达明显上调(p<0.01)；与3d组相比,表达量虽有上调趋势,差异并无统计学意义(p>0.05)。5.神经干细胞诱导分化过程中各组slit2mRNA的表达量：各组之间两两比较,差异无统计学意义(p>0.05)。结论：Slit2/robol信号通路可能参与缺血后抑制性微环境的形成,影响内源性或外源性的神经干细胞的迁移,影响脑缺血后的神经再生修复。