【摘 要】
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目的:探究TRB3在人肝癌细胞MHCC-97H中的表达和生物学功能,并初步探讨其作用机制。方法:运用Real time PCR测定正常肝细胞L-02和肝癌细胞MHCC-97H中TRB3 mRNA的表达;通过shRN
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目的:探究TRB3在人肝癌细胞MHCC-97H中的表达和生物学功能,并初步探讨其作用机制。方法:运用Real time PCR测定正常肝细胞L-02和肝癌细胞MHCC-97H中TRB3 mRNA的表达;通过shRNA抑制TRB3在人肝癌细胞MHCC-97H中的表达,使用CCK-8法测定细胞增殖和死亡情况;同样通过shRNA抑制TRB3和CHOP在MHCC-97H中的表达,运用Western Blot和Real time PCR测定对应的CHOP和TRB3的蛋白和mRNA表达情况;运用Western Blot检测TRB3抑制后,MHCC-97H细胞中AKT和pAKT的表达。结果:TRB3 mRNA在肝癌细胞MHCC-97H中表达较其在正常肝细胞L-02中升高3.8倍,且具有统计学意义(p<0.05);肝癌细胞MHCC-97H的TRB3表达被抑制后,细胞活性较空转质粒组显著上调(p<0.05)。当肝癌细胞MHCC-97H的CHOP基因被抑制后,TRB3mRNA和蛋白的表达水平下调(p<0.05);当肝癌细胞MHCC-97H的TRB3基因被抑制后,CHOP mRNA和蛋白的表达水平也显著下调(p<0.05)。抑制肝癌细胞MHCC-97H的TRB3表达后,AKTmRNA表达下调(p<0.05),AKT蛋白表达有所下降但并无统计学意义(p>0.05),pAKT显著上升(p<0.05)。结论:TRB3在肝癌细胞MHCC-97H中表达升高,能够调控细胞死亡,其作用机制可能与激活内质网应激蛋白CHOP和抑制AKT磷酸化有关,具有进一步研究的价值。
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