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目的:观察蛋白酶体抑制剂诱导大鼠黑质变性伴包涵体形成及运动行为改变,探讨蛋白酶体功能下降在帕金森病发病机制中的作用。方法:(1)将蛋白酶体抑制剂Lactacystin10μg /2μl立体定向注射入大鼠左侧黑质致密部,对照组注射等体积的生理盐水;(2)观察大鼠自主行为和阿朴吗啡诱导的旋转行为的改变;(3)开野实验观察大鼠自发运动行为改变,检测指标:总跑动时间、总停息时间、下肢站立次数、穿梭距离、大鼠自发向左侧或右侧行1/4弧度的环形活动的次数、下肢站立时左侧或右侧前肢倚靠箱壁的次数和大鼠躯干左侧或右侧靠近箱壁进行探究活动的次数;(4)HE染色法观察黑质致密部病理改变;(5)Nissl染色法观察黑质致密部病理改变;(6)免疫组织化学法观察黑质致密部酪氨酸羟化酶免疫阳性细胞形态改变,并对酪氨酸羟化酶免疫阳性细胞进行计数;(7)免疫组织化学法观察黑质致密部神经元内α-共核蛋白量及分布形式的改变;(8)免疫组织化学法观察纹状体内酪氨酸羟化酶免疫阳性神经纤维数目的改变;(9)透射电镜观察黑质致密部及纹状体超微结构的改变。结果:(1)Lactacystin组大鼠给药1周后出现自发性活动减少,动作缓慢,震颤、对外界刺激不自主竖毛,且症状逐步加重;阿朴吗啡可诱导出向健侧的旋转运动,3周后的30分钟旋转次数为266.92±9.19。(2)Lactacystin组大鼠的总跑动时间、总停息时间、下肢站立次数及穿梭距离与生理盐水组大鼠相比减少(p<0.05),Lactacystin组大鼠自发向左侧1/4弧度的环形活动的次数、下肢站立时左侧前肢倚靠箱壁的次数及大鼠躯干左侧靠近箱壁进行探究活动的次数与右侧相比增多(p<0.05);(3)HE染色法观察Lactacystin组大鼠左侧黑质致密部神经元数目减少,呈变性改变,神经元胞膜不完整,结构不清,胞浆内可见嗜伊红包涵体,胶质细胞增多;(4)Nissl染色法观察Lactacystin组大鼠左侧黑质致密部神经元数目减少,Nissl体染色较淡,结构松散;(5)Lactacystin组大鼠左侧黑质致密部TH免疫阳性神经元数量少,胞体皱缩变小,结构不清,细胞数较右侧减少了81.33%(p<0.05);(6)Lactacystin组大鼠左侧黑质致密部神经元胞浆内α-共核蛋白量增加,呈聚集样表现,胞浆浓染,可见数个圆形或椭圆形包涵体样浓聚物,α-共核蛋白免疫反应呈强阳性;(7)Lactacystin组大鼠右侧纹状体TH免疫阳性纤维密集,平均光密度值为0.2165±0.0017;左侧TH免疫阳性纤维数量减少,分布稀疏,平均光密度值为0.0406±0.0006,两者比较有统计学差异(p<0.05);(8)电镜下,Lactacystin组大鼠左侧黑质致密部神经元数量稀少,多数残存神经元呈现凋亡征象;髓鞘出现松散、断裂,偶可见髓壳变薄,突起膨胀变粗,内含大量类圆形电子致密物;电子致密物有一个致密核心,周围为同心圆排列的纤维蛋白丝样结构,可能为突起内蛋白质聚集的电镜表现。个别胶质细胞亦呈现凋亡现象。Lactacystin组大鼠左侧纹状体内神经纤维数量减少,残存纤维的髓鞘出现松散、断裂改变,纤维内线粒体数量减少,肿胀变性。结论:蛋白酶体抑制剂Lactacystin10μg /2μl单侧黑质致密部微量注射可以诱导大鼠黑质变性伴包涵体形成并表现出类似PD临床症状的运动行为改变,可以利用Lactacystin制备更为理想的PD动物模型,蛋白酶体功能下降可能在帕金森病的发病机制中起重要作用。