【摘 要】
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目的 本研究通过生物信息学技术,分析基因芯片,寻找卵巢癌与正常卵巢组织之间差异性表达的分子,筛选Nu SAP1基因为本实验研究对象。通过体外实验,研究Nu SAP1基因的敲减对卵巢癌细胞株的增殖活性、转移能力及细胞周期等细胞表型的影响,并探讨可能的分子机制。方法 应用生物信息学方法,选取公共平台基因芯片,筛选出卵巢癌与正常卵巢组织之间差异性表达的分子;采用脂质体介导转染法应用si RNA敲减Nu
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目的 本研究通过生物信息学技术,分析基因芯片,寻找卵巢癌与正常卵巢组织之间差异性表达的分子,筛选Nu SAP1基因为本实验研究对象。通过体外实验,研究Nu SAP1基因的敲减对卵巢癌细胞株的增殖活性、转移能力及细胞周期等细胞表型的影响,并探讨可能的分子机制。方法 应用生物信息学方法,选取公共平台基因芯片,筛选出卵巢癌与正常卵巢组织之间差异性表达的分子;采用脂质体介导转染法应用si RNA敲减Nu SAP1基因的表达,并采用聚合酶链式反应实验和蛋白免疫印迹实验检测、筛选敲减效率满意的si RNA序列,运用CCK8实验、克隆形成实验检测敲减Nu SAP对卵巢癌细胞增殖的影响,运用划痕实验验证对卵巢癌细胞迁移能力的影响,运用流式细胞术验证对卵巢癌细胞周期的影响,实验数据进行t检验比较。最后,聚合酶链式反应实验和蛋白免疫印迹实验检验Nu SAP1敲减对细胞周期蛋白、Wnt/β-catenin信号通路蛋白的影响。结果 经过基因芯片分析,我们筛选出CDKN2A、EHF和NUSAP1等作为候选因子,并且在卵巢癌组织中进行q PCR实验,得以验证。脂质体转染法si RNA敲减Nu SAP基因可明显抑制卵巢癌细胞系SKOV-3的增殖、迁移能力,同时也诱导细胞周期阻滞。进一步探索,发现NUSAP1的高表达可能是通过Wnt/β-catenin信号通路(Canonical Wnt/β-catenin pathway)发挥作用。结论 NuSAP1在卵巢癌的异常高表达可能促进卵巢上皮性癌恶性生物学行为,可能是通过Wnt通路调控EMT途径、干扰细胞周期通路而实现。
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