【摘 要】
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黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr)为茄科枸杞属落叶小灌木。在中国主要分布于新疆、宁夏、西藏、甘肃、青海、和内蒙等地区,是一种富含各种营养成分,具有较高的营养价值及药用价值的野生植物。为解决采摘困难、果实产量低等黑果枸杞产业发展限制条件,为我国农业及环境问题提供有价值的资料,本研究分别以格尔木黑果枸杞一年生枝条和种子无菌苗为外植体,分别建立离体培养生再体系,比较两种外植体选择适
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黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr)为茄科枸杞属落叶小灌木。在中国主要分布于新疆、宁夏、西藏、甘肃、青海、和内蒙等地区,是一种富含各种营养成分,具有较高的营养价值及药用价值的野生植物。为解决采摘困难、果实产量低等黑果枸杞产业发展限制条件,为我国农业及环境问题提供有价值的资料,本研究分别以格尔木黑果枸杞一年生枝条和种子无菌苗为外植体,分别建立离体培养生再体系,比较两种外植体选择适宜度,旨在为黑果枸杞的离体培养技术方向开拓思路,为黑果枸杞种质资源的挖掘与保存提供参考依据。同时,利用该品系种子为供试材料,用秋水仙素进行染色体加倍试验,以期获得多倍体(四倍体)植株,并采用形态学、细胞学及流式细胞术等多种染色体鉴定法鉴定染色体倍性(四倍体),为该品系黑果杞种质创制、资源合理利用建立理论与实践依据。研究结果如下:(1)黑果枸杞一年生茎段做为外植体消毒最佳方式为75%乙醇溶液浸泡1min～2min,再用8%的次氯酸钠溶液浸泡12min。(2)愈伤组织培养基为MS+6-BA0.5mg/L+IBA0.5mg/L,出愈率为94.89%;愈伤组织增殖培养基为:MS+IAA0.1mg/L+IBA 0.5mg/L;愈伤组织生长分化培养基为:MS+6-BA 1.Omg/L+IAA0.1mg/L;从生芽丛培养基为:MS+NAA 1.Omg/L;丛生芽增殖培养基为MS+NAA 0.1mg/L+IBA 0.5mg/L;再生体系建立生根培养基为MS+IBA 0.5mg/L。(3)炼苗移栽:壤土:营养土:蛭石的比例为3:1:1的混合基质中移栽苗的成活率达到71.6%。(4)种子培养无菌苗为外植体建立再生体系:种子最适消处理75%酒精1min+8%NaClO溶液8min;在MS基础培养基中种子发芽率可达94.00%。利用无菌苗做外植体进行再生体系的建立培养基为MS+IBA 0.5mg/L。(5)二倍体核型公式为:2n=2x=24=12sm+12m(3SAT)核型为2B型。秋水仙素处理种子浓度为0.3%,处理时间24h,并得出四倍体核型公式为:2n=4x=48=24sm+24m(3SAT),核型为2B型。(6)通过形态学、细胞学、分子水平上的流式细胞仪鉴定DNA含量等方法鉴定染色体加倍多倍体(四倍体)的真实性。
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