目的 1．改进目前实验性高眼压大鼠模型，观察高眼压引起的缺血再灌注后视网膜神经节细胞层热休克蛋白70(HSP70)表达情况； 2．建立热休克大鼠模型，检测高眼压状态下、热休克后与热休克蛋白抑制后大鼠视电生理的变化情况及热休克蛋白70的表达情况； 3．观察热休克反应对大鼠视网膜超微结构变化的影响； 4．评价热休克蛋白70在高眼压导致视网膜缺血再灌注损伤时的保护作用。 方法 1．利用流体力学帕斯卡原理，建立大鼠实验性高眼压缺血再灌注模型，采用免疫组织化学和图像分析的方法研究再灌注后不同时间视网膜神经节细胞层细胞密度和热休克蛋白70表达情况； 2．采用热环境方法建立大鼠热休克模型，通过热休克前24h向腹腔注射槲皮素可以特异性抑制热休克蛋白70的表达。按照第四军医大学硕士学位论文 中文摘要 国际临床视觉电生理学会的标准化方案，采用国特医疗视电 生理检测系统测定热休克反应后实验性高眼压大鼠模型和 HSP70被懈皮素特异性抑制后实验性高眼压大鼠模型进行暗 适应视网膜电图（Dark adapted ERG，D－ERG）、振荡电位 （oscillatory potentials，OPs）和明适应视网膜电图（Light adapted ERG，L－ERG）记录。i用Western blotting方法检 测各组大鼠视网膜HSP70表达情况。3．高眼压条件下维持眼底缺血状态Zh，再分别于恢复血液再 灌注0 h，8 h，24 h，48 h，7 d处死大鼠，取出视网膜组 织，电镜观察。结果1．再灌注48 h组节细胞密度臼．22if．64个／100pm）较其他各 组均低（Prto．05人 正常和再灌注不同时间后大鼠视网膜节细 胞层 HSP70表达灰度值之间差异有显著性，24 h组灰度值 （148．358t8．050）较其它各组低（P＜0．05）。2．高眼压十热休克组大鼠视网膜HSP70表达在各组大鼠中最高， 高眼压＋檄皮素组、高眼压＋热休克＋棚皮素组大鼠视网膜 HSP70表达受到抑制。高眼压灌注后各组大鼠ERG各波潜伏 期延长，幅值减小，高眼压＋热休克组D＊RG的b波、OPS 的 OZ波的幅值较 P组高。灌注 0 h后，高眼压十热休克组各波 幅值＊波（13．9士3．l加又b波（79．silo二2）八＊波（26．silo．5） 卜＊比高眼压组［a波（1．D4．6） l又 b波O．乃17．2）以＊波 （ZI．3士9．5）卜VI显著增高（P＊5）；灌注 24 h后，高眼压十热休 克组大鼠视网膜功能恢复较P组好。高眼压＋棚皮素组、高眼 5第四军医大学硕士学位论文 中文摘要 压＋热休克＋栅皮素组潜伏期最长，幅值最低，甚至消失。3．电镜下观察再灌注sh视网膜外核层、内核层细胞死亡表现出 凋亡和坏死两种特征，神经纤维层水肿明显，细胞线粒体出现 空泡样结构，24 h有视网膜节细胞凋亡数量最多，48 h减少， 7d后凋亡细胞数量减少，细胞密度减小，视网膜萎缩变薄。结论1．HSP70的表达与缺血再灌注时间关系密切，HSP70在视网膜节 细胞损伤与防护环节中可能起到重要作用。2．HSP70可以减轻高眼压灌注大鼠视电生理损伤，HSP70被抑制 后视电生理损伤最严重，热休克反应可以提高大鼠视网膜细胞 对缺血再灌注损伤的防御作用。3．热休克反应后急性高眼压条件下视网膜各层细胞易损性不同， 缺血再灌注不同时间各层超微结构变化不一致，凋亡不仅是视 网膜节细胞的死亡形式也是其它层细胞的死亡形式。