目的:探索不同剂量黄芩素对单侧输尿管结扎诱导的大鼠肾肾间质纤维化病程的干预作用及其可能的作用机制,并为黄芩素治疗和逆转肾间质纤维化的临床应用提供依据。方法:1.模型建立:选取30只健康的Wistar大鼠,雌雄各15只。适应性喂养1周后,称取体重,随机分为假手术组(n=12)、手术组(n=18)造模。采用单侧输尿管结扎术制备肾间质纤维化模型。手术组于术后第3天、7天、10天各取6只处死,假手术组大鼠于对应相同时间节点每次取4只处死。摘取梗阻侧肾脏,行HE染色,观察肾脏病理改变,记录造模成功时间节点;2.药物干预:依据造模结果,选择造模成功时间节点作为药物干预结束时间。选取40健康的Wistar大鼠,雌雄各20只。适应性喂养1周后,随机分为两组,分别为假手术组(n=10)和手术组(n=30)进行造模。造模成功后,将手术组随机分为3组,分别为模型组、黄芩素低剂量组、黄芩素高剂量组,每组各10只。黄芩素低剂量组给以2%黄芩素溶液50mg/kg/d,黄芩素高剂量组给以2%黄芩素溶液100mg/kg/d,每日灌胃1次,至造模成功时间节点;模型组和假手术组则每日给予50mg/kg生理盐水灌胃,灌胃时间相同。实验终末记录大鼠体重变化,收集血清,并留取肾脏组织,记录其重量变化,检测血肌酐、尿素氮、β微球蛋白(β2-MG)和视黄醇结合蛋白(RBP4)、肾脏组织病理损伤,肾小管及间质胶原纤维面积变化,免疫组化法检测平滑肌结合蛋白(α-SMA)表达情况,蛋白免疫印迹法检测内质网应激相关蛋白CHOP、caspase-3变化。结果:1.各组大鼠肾脏病理改变随造模时间延长日益加重,术后第3天出现肾小管扩张、肾小管上皮细胞脱落和坏死;第7天出现肾间质组织增多、伴单核细胞浸润;第10天出现较明显肾小管损害和肾间质纤维化改变。提示第10天可作为造模时间节点;2.黄芩素低剂量组、高剂量组与模型组比较大鼠体重增加(P<0.01),黄芩素高剂量组与低剂量组比较,体重增加更为明显,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05);肾脏系数:黄芩素高剂量组与模型组相比肾脏系数降低,差异有统计学意义(P<0.01);黄芩素低剂量组、高剂量组尿素氮水平与模型组相比下降,差异有统计学意义(P<0.01);黄芩素低剂量组、高剂量组血清β2-MG和RBP4与模型组比较含量减少(P<0.05),高剂量组与低剂量组比较,下降更为明显,两组差异有统计学意义(P<0.01);HE染色显示:黄芩素低剂量组、高剂量组与模型组比较,肾小管上皮细胞变性、肾间质水肿、炎症细胞浸润减轻;Masson染色显示:与模型组比较,黄芩素低剂量组、高剂量组,胶原纤维沉积面积减少(P<0.01);免疫组化显示:黄芩素低剂量组、高剂量组α-SMA阳性表达面积与模型组相比有所减少,差异有统计学意义(P<0.01);蛋白免疫印迹显示:黄芩素低剂量组、高剂量组与模型组相比,CHOP、caspase3表达量有下降(P<0.01),黄芩素高剂量组与低剂量组比较,CHOP、caspase3表达量下降更为明显,两组间差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:(1)黄芩素可有效干预输尿管结扎造成的肾小管和间质损伤,保护肾功能;(2)黄芩素可延缓肾间质纤维化进程,这可能与其对内质网应激、细胞凋亡的抑制作用有关。