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目的:探究miR-181d对喉癌Hep2细胞生物学行为的影响;验证miR-181d是否参加下调喉癌抑癌基因LCRG1的表达。方法:1、运用软件预测的miR-181d和LCRG1基因3′UTR的潜在结合位点,并通过双荧光素酶试验进一步验证。2、运用Western blot实验明确瞬时转染mimics/inhibitor NC对照组、miR-181d mimics/inhibitor实验组及空白组LCRG1蛋白的表达变化。3、运用MTT实验、划痕实验、体外细胞迁移实验、体外实验侵袭实验明确瞬时转染mimics/inhibitor NC Hep2细胞对照组、miR-181d mimics/inhibitor Hep2细胞实验组及空白组Hep2细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化。4、运用流式细胞术检测细胞周期实验、流式实验检测细胞凋亡实验明确瞬时转染mimics/inhibitor NC对照组、miR-181d mimic/inhibitor实验组及空白组Hep2细胞凋亡情况。结果:1、双荧光素酶报告基因实验结果:miR-181d与LCRG1 3’UTR的第一个结合位点可能是miR-181d的结合位点。2、Western blot实验结果:mimics NC组和空白组LCRG1蛋白表达无明显差异(P>0.05),miR-181d mimics组LCRG1蛋白表达较mimics NC组和空白组显著性降低(P<0.05);inhibitor NC组和空白组LCRG1蛋白表达不存在显著差异(P>0.05),miR-181d inhibitor组LCRG1蛋白表达较inhibitor NC组和空白组增高(P<0.05)。3、MTT实验、划痕实验、体外细胞迁移实验、体外实验侵袭实验:与NC对照组和空白组相比,Hep2细胞瞬转miR-181d mimic后,迁移、侵袭细胞数量明显增加,迁移及侵袭能力受到显著增强(P<0.05);而瞬转miR-181d inhibitor后,迁移、侵袭细胞数量降低,迁移及侵袭能力受到显著抑制(P<0.05)。4、流式细胞术检测细胞周期实验、流式实验检测细胞凋亡实验结果:miR-181d inhibitor实验组G1期百分率及细胞凋亡率均高于inhibitor NC组和空白组,并使细胞周期主要抑制于G1期。结论:在Hep2细胞中miR-181d可以结合LCRG1 3’UTR,负性调控LCRG1的表达并使Hep2细胞增殖、迁移和侵袭能力增强.