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目的:探讨胰激肽原酶(PK)对单侧输尿管梗阻(UUO)诱导的大鼠肾脏纤维化的保护作用。方法:本实验使用21只7周龄的清洁级雄性SD大鼠,随机分假手术组(Sham组);单侧输尿管梗阻(UUO)组,单侧输尿管结扎术后注射胰激肽原酶(7.2U/kg/day)7天治疗组(UUO+PK组)。实验过程中每日测量各组大鼠体重(BW),并于实验结束时收集各组24h尿液,采用尿液分析仪器检测24小时尿蛋白排泄量(UPE);采用全自动血清生化分析仪检测大鼠血清尿素氮(BUN),血清肌酐(Scr);采用酶联免疫吸附法测定血清及尿8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平。采用Masson三色染色法观察各组肾脏组织纤维化的变化;采用免疫组化法观察各组肾脏组织中ED-1和8-OHdG的表达情况;采用免疫印迹法测定转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、白细胞介素-6(IL-6)和活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved Caspase-3)的表达情况;采用TUNEL原位染色方法观察肾脏组织的凋亡情况。结果:1.大体观察 与Sham组相比,UUO组大鼠肾脏颜色苍白,体积增大,肾实质明显变薄,切面可见肾盂、肾盏扩张,肾实质及髓质萎缩且分界模糊,UUO+PK组大体改变与UUO组相似。2.基本指标与生化指标 与Sham组比较,UUO组大鼠BW、UV、BUN、Scr和UPE无明显变化;UUO组与UUO+PK组比较BW、UV、BUN、Scr和UPE仍无明显变化。3.酶联免疫吸附法测定结果 UUO组血清及尿液的8-OHdG较Sham组明显升高;与UUO组相比,UUO+PK组的血清及尿液的8-OHdG明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。4.免疫组织化学染色结果 UUO组大鼠肾组织的8-OHdG的表达和ED-1阳性细胞表达较Sham组明显增加(P<0.05);给予PK治疗后的UUO组大鼠肾组织中8-OHdG的表达和ED-1阳性细胞表达减少(P<0.05)。5.Masson三色染色结果 与Sham组相比,UUO组大鼠肾小管间质细胞外基质(ECM)沉积,弥漫性肾小球硬化(P<0.05);与UUO组相比,UUO+PK组大鼠肾小管间质ECM沉积程度减少,肾小球硬化弥漫程度明显改善(P<0.05)。6.免疫印迹法分析结果 UUO组大鼠肾组织中TGF-β1、CTGF、MMP-2、IL-6和Cleaved Caspase-3的表达较Sham组显著升高,MnSOD表达明显减少;与UUO组相比,UUO+PK组大鼠肾组织中TGF-β1、CTGF、IL-6、MMP-2和Cleaved Caspase-3表达显著降低,MnSOD表达明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。7.TUNEL染色结果 Sham组大鼠肾组织中几乎无凋亡细胞,UUO组肾脏组织中TUNEL阳性细胞数量较Sham组明显增高;与UUO组相比,UUO+PK组肾脏组织中的TUNEL阳性细胞数量显著减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:胰激肽原酶对UUO模型大鼠肾脏纤维化具有良好的保护作用,其机制可能与胰激肽原酶改善纤维化程度、抑制炎症反应、抗氧化应激及调控细胞凋亡相关。