本论文分三章,第一、第二章利用一步电沉积法,构筑了两种新型的双酶生物传感器;第三章利用新型层状CaCO₃-AuNPs无机杂化生物复合材料自组装法固定HRP,制备了一种无媒介型H₂O₂传感器。1、第一章基于一步电沉积法和溶胶-凝胶技术,以含有环氧基团的γ-环氧丙氧丙基三甲氧基硅烷（γ-GPTMS）为无机杂化试剂和功能性交联试剂,通过壳聚糖（CS）、HRP和GOD分子中-NH₂与环氧基团的反应,在金电极表面原位制备交联型有机-无机生物杂化膜,得到共固定HRP和GOD的新型双酶生物传感器。实验证实了这种有机-无机生物杂化膜在不同的酸、碱条件下都具有高的稳定性和耐用性,克服CS酸溶的不足,从而扩大了其使用范围。在葡萄糖检测中,交联型双酶传感器HRP-GOD/GPTMS/CS/Au比无交联的双酶传感器HRP-GOD/CS/Au具有更高的灵敏度、更宽的线性范围,其线性范围为1 351μM,检测限为0.3μM。2、第二章利用双功能交联剂伴刀豆球蛋白（Con A）原位结合HRP和GOD,基于一步电沉积构筑了一种新型双酶生物传感器。利用Con A与CS、HRP和GOD的生物特异性结合,采用一步电沉积法在金电极表面形成稳定的HRP-GOD/Con A/CS生物复合物膜。所构筑的生物传感器成功用于葡萄糖的测定,线性范围为1.0×10-6 2.2×10-4 M,检测限为6.7×10^-7 M。该新型双酶生物传感器的制备方法简便可控,且具有良好的稳定性和再生性。3、第三章基于层状CaCO₃-AuNPs无机杂化复合材料,构筑了新颖的无媒介H₂O₂生物传感器。4-氨基苯硫酚（4-ATP）通过Au-S键作用自组装到裸金电极表面。氨基可通过Au-NH₂作用,将层状CaCO₃-AuNPs无机杂化复合材料固定到电极表面上。HRP可以通过静电作用吸附AuNPs。同时,HRP中的氨基对AuNPs具有稳定作用。基于该传感器对H₂O₂具有良好的电催化行为,测定H₂O₂的线性范围为5.0×10^-7 5.2×10^-3 M,检测限为1×10^-7 M。该传感器具有良好的重现性和稳定性。