白术及其与甘草配伍对IEC-6细胞p53、p21基因表达的影响

来源 :广州中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangbohan1991
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
背景:白术为常用健脾益气中药之一,具有健脾益气,燥湿利水,止汗安胎之功效,可用于脾虚食少,腹胀泄泻,痰饮眩悸、水肿、自汗、胎动不安等病证的治疗。临床以白术为主组成的方剂较多用于胃肠疾病的治疗。近代临床和药理研究均表明白术具有明显的胃肠黏膜保护作用,其有效提取部位能促进小肠上皮细胞的增殖、分化和迁移,而另有研究表示白术多糖对小肠上皮细胞有增殖抑制作用。在临床健脾益气方中白术和甘草常一起配伍使用,且甘草对多种以粘膜损伤为特征的疾病和病理状态具有治疗作用。在实验室的前期研究工作中发现甘草可通过促进 DFMO诱导的生长抑制模型的IEC-6细胞的增殖,对肠粘膜上皮起保护作用。且该研究证明甘草能通过下调p53、p21mRNA及其蛋白的表达,起促细胞增殖作用。因此,本论文研究白术与甘草配伍对DFMO模型IEC-6细胞增殖及其p53、p21mRNA和蛋白表达的影响,探讨其配伍作用与单独药物作用的区别。为白术健脾作用在临床的运用提供实验依据。  目的:  1.研究白术对IEC-6细胞和DFMO模型IEC-6细胞增殖的影响;  2.研究白术与甘草配伍对DFMO模型IEC-6细胞增殖的影响;  3.研究白术及其与甘草配伍对DFMO模型IEC-6细胞p21、p53mRNA和蛋白表达水平的影响。  方法:  1.细胞模型和用药:以IEC-6细胞和DFMO诱导的生长抑制IEC-6细胞为模型细胞。实验所用白术和甘草均为中药配方颗粒,购买于江阴天江药业有限公司,批号分别为:1008144和1102021。  2.白术对细胞增殖作用的检测:采用MTT法检测细胞活性和基于流式细胞术的CFSE标记检测细胞分裂速度以及PI染色检测细胞周期分布三种方法,研究白术及其与甘草配伍对IEC-6细胞和DFMO诱导IEC-6细胞增殖的影响并确定有效作用时间和剂量范围。  3.白术对IEC-6细胞p53、p21mRNA和蛋白表达影响的检测:利用qRT-PCR技术和Western Blot蛋白免疫印迹技术,分别检测白术及其与甘草配伍对不同模型IEC-6细胞p53、p21mRNA和蛋白表达水平的影响。  结果:  1.白术颗粒剂量(AM108μg/mL和 AM216μg/mL)在加药处理24h和48h内对IEC-6细胞的增殖无明显影响,而白术颗粒(AM432μg/mL和AM2160μg/mL)在作用细胞48h后对细胞的增殖具有显著的抑制作用,但在加药处理72h后,各剂量组白术颗粒均能显著抑制IEC-6细胞的增殖。其抑制作用与p21mRNA及其蛋白表达水平的增加有关;  2.白术颗粒对DFMO诱导IEC-6细胞的增殖未见明显影响,但实验所用剂量白术颗粒可上调DFMO诱导IEC-6细胞p53、p21mRNA和蛋白的表达水平;  3.白术颗粒与甘草颗粒不同比例配伍均能显著下调单独白术颗粒作用对DFMO模型IEC-6细胞p53、p21mRNA和蛋白表达的影响,促进IEC-6细胞的增殖。  结论:本实验所选用剂量白术颗粒对 IEC-6细胞的增殖具有显著的抑制作用,进一步的研究表明该抑制作用与白术颗粒在转录水平以及蛋白水平上调周期抑制蛋白p21的表达有关,且其对p21mRNA及蛋白表达的调控为非p53依赖途径;而对于DFMO模型IEC-6细胞,甘草颗粒与白术颗粒配伍使用,可显著下调单独白术颗粒作用所诱导的p53、p21mRNA和蛋白的表达水平,表明在此细胞模型中配伍用药甘草能调和白术的药性,降低其对IEC-6细胞增殖的影响。
其他文献
摘 要: 本文以运动心理学为理论依据,论述了在体育教学过程中运用想象训练对学生学习、掌握技术动作,改进动作质量,以及对增强学生的自信心方面都有着积极的意义。运用这一心理训练方法,能够收到事半功倍的效果,有效地促进教学、训练质量的提高,因此,在体育教学训练中,我们可以结合自己在生活中看到、听到、认知到的事物,通过想象,使学生在上训练课时,沉浸在一种想象的情境中,使每次的练习成为一种创造性的活动
摘 要: 女大学生对健美操运动的减脂塑身功效都深信不疑,但往往不能取得实际的锻炼效果,这主要与学生缺乏科学锻炼的知识技能有关。健美操教师要努力改进教学,探讨健美操教学对女大学生身体成分的良好影响,有效促进学生身体的健康发展,为学生的终身体育打好基础。  关键词: 健美操教学 身体成分 减脂塑身  1.引言  健美操作为一项体育健身运动,深受女大学生的喜爱。女大学生都非常关注自己的
摘 要: 作者根据某大学网上选课情况分析,对某大一、大二女大学生的体育选课态度、行为及能力现状进行了调查,了解了当前女大学生选择体育项目存在的问题,以期为进一步深化高校体育改革提供依据。  关键词: 女大学生 体育选课态度 行为  目前,我国高校体育教学项目呈现多样化的特征,通过对健美操、体育舞蹈、瑜伽体育教学项目的研究分析,发现大一女生与大二女生选课存在一些问题,并提出今后改革
目的:针对维吾尔族、汉族变应性鼻炎患者和正常健康人IL-4、IFN-γ基因甲基化进行研究,分别探讨IL-4、IFN-γ基因甲基化在维吾尔族、汉族AR患者与健康者是否存在差异性。方法:选
本文论述了校园体育文化对实施素质教育、培养可持续发展人才的重要作用,论证了建立湖南科技大学体育文化活动中心的可行性,探讨了建立体育文化活动中心的具体措施,展望了在
防守技巧的好坏是一支球队能否取得比赛胜利的关键,现代篮球的进攻越来越犀利,其手段越来越隐蔽、多样,这就对防守队员提出了更高的要求,防守队员能力的强弱则成了整支球队防
摘 要: 中老年是社会群体的重要组成部分,他们能否健康、舒适、祥和地安度晚年,直接影响着和谐社会的发展。本文采用问卷调查、文献资料等方法对宜州市城区中老年参加体育锻炼的状况进行调查,以中老年人的生活状况、体育意识、体育活动的形式、参与体育活动的积极性为切入点,分析主要制约因素,并提出相应的对策,以期为宜州城市中年人参加体育锻炼提供参考。  关键词: 宜州市城区 中老年体育锻炼 现
课堂教学是学校教学工作的主要形式,我们应抓住课堂教学这一主阵地,努力提高课堂教学效率。结合个人教学经验,谈谈信息技术与体育课堂的有机整合。  一、观念的转变  观念的转变是研究本课题的一个重要条件。在实验中,不仅要教给学生信息知识,更重要的是让学生掌握信息技术并能熟练应用,提高学生解决问题的能力和学习能力,提高学生的信息素养。它要求教师必须改变旧的教学观念,不要人为地在信息技术课程与体育学科之间划
体育教育是学校教育中的一个有机组成部分,是实施素质教育的一个重要方面,它对于学生良好思想品质及高尚道德情操的培养,对于学生健全人格的塑造,学习兴趣、意志品质等非智力因素的提高都有着巨大的促进作用,因而增强体育课的教学效果相当重要。如何才能增强体育课的教学效果呢?可从以下几方面入手。  一、从教师本身来讲,要热爱体育,为人师表。  使学生德、智、体全面发展,是每一位教师责无旁贷的义务。忠诚教育事业,