miRNA成熟过程中相关基因(DICER、DROSHA及RAN)的多态性与不明原因复发性流产的相关性研究

来源 :成都中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mnjhkiuu
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目的:  miRNA参与人类胎盘生成和胚胎植入过程,miRNA同时调控炎症反应相关的基因表达,并与母胎免疫耐受相关。miRNA生成过程中一些关键蛋白,如DICER、DROSHA和RAN,通过调控miRNA的生成,进而影响与生殖相关蛋白的表达。因此miRNA与人类生殖密切相关。复发流产为一种复杂的多因素疾病,其中50%~70%为不明原因的复发流产(unexplained recurrentspontaneous abortion, URSA),可能与潜在的遗传缺陷有关,如单核苷酸多态性。本研究探讨miRNA成熟关键基因DICER、DROSHA和RAN的多态性与女性复发流产的相关性。  方法:  收集2013年6月到2016年6月于四川大学华西第二医院生殖内分泌科和遗传优生科及成都市第二人民医院妇产科就诊的复发流产患者,经过一系列的实验室检查筛选,包括染色体核型、甲状腺功能、生殖免疫、性激素、B超、生殖道感染、TORCH、凝血、肝肾功等检查,最终有不明原因复发流产患者217例纳入研究。对照组为同期在四川大学华西第二医院和成都市第二人民医院体检和孕前检查的健康育龄妇女390例,均至少有1次正常生育史。采用病例对照研究的方法,应用PCR一限制性片段长度多态性技术检测miRNA成熟过程中关键基因DICER rs3742330和DROSHA rs10719、RAN rs14035单核苷酸多态性。应用电泳凝胶进行基因型分型,并结合基因测序进行验证,本研究主要采用x2检验比较等位基因和基因型频率差异,单因素Logistic回归统计出风险等位基因最有意义的遗传模式,根据遗传模式再用多元Logistic回归模型分析三个位点之间基因型组合效应与复发流产的相关性.  结果:  拟和优度x2检验结果显示病例和对照组 DICERrs3742330、DROSHArs10719、RANrs14035三个位点基因型分布,均符合Hardy-Weinberg定律(P均>0.05)。PCR产物序列测定结果与酶切凝胶电泳结果基因分型一致。本研究中DICER rs3742330、DROSHA rs10719、RAN rs14035各等位基因和基因型频率在病例和对照组无统计学差异(P均>0.05)。单因素Logistic回归结果显示, DICER3742330倾向于隐性模式( P=0.007), DROSHArs10719( P=0.088)和RANrs14035(P=0.031)倾向为显性模式。根据每个基因位点确定的遗传模式,我们进一步对miRNA成熟相关基因DICER rs3742330、DROSHArs10719及 RAN rs14035的多态性联合分析,以RAN14035为参照,病例组DICERrs3742330/DROSHArs10719GG/TT+TC基因型频率高于对照组(OR=1.657,95%CI=1.006-2.731,P=0.047)使不明原因复发流产的风险增加,为危险因素。同时,以DROSHA10719为参照,DICERrs3742330/RANrs14035GG/CC在不明原因复发流产组高于对照组,但无统计学差异(OR=1.977,95%CI=0.956-4.087,P=0.066),而DROSHArs10719/RAN14035TT+TC/CC与不明原因复发流产无相关性(OR=0.958,95%CI=0.679-1.353,P=0.808)。  结论:  单个位点基因型分析中,我们的研究未发现DICERrs3742330,DROSHA rs10719,RANrs14035与不明原因复发流产存在显著相关性,但DICERrs3742330联合DROSHA rs10719的协同作用与不明原因复发性流产显著相关。
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