LC-MS非靶标和靶标代谢组学分析普洱茶渥堆过程中关键标记物

来源 :安徽农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:highbird51426
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
普洱茶因其独特的风味特征受到越来越多的关注,其特有化学物质和健康功效也被广泛研究报道。一般认为,普洱(熟)茶的品质特征形主要形成于渥堆阶段。因此,普洱茶在渥堆过程中化学成分变化具有一定的研究意义。目前,尽管普洱茶的相关研究很多,然而渥堆过程中化学成分的变化却鲜有系统报道。传统渥堆工序对微生物、温、湿度的控制存在较大的不确定性,其品质往往难以保持一致。现代数控发酵能够精确控制发酵过程中的温、湿度、含氧量等参数,是普洱茶标准化和清洁化生产的发展方向。然而,数控发酵过程中化学物质和感官品质变化尚不明确。因此,探究数控发酵过程中普洱茶化学成分的变化规律,对优化发酵的工艺和改善产品的品质具有基础性研究意义。本文通过感官审评评定了渥堆过程中晒青毛茶、一翻、二翻、三翻、普洱(熟)茶共五组样品的外形、汤色、香气、滋味和叶底上所发生的改变。通过高效液相色谱法(HPLC)测定了儿茶素、没食子酸、咖啡碱、可可碱及茶褐素的含量,利用液相色谱-四极杆飞行时间质谱仪(LC-Q-TOF-MS)对普洱茶渥堆发酵过程中样品的化学成分进行非靶标和靶标代谢组学研究,基于多元统计分析方法发现了 53个关键标记化合物,通过液相色谱-三重四极杆质谱仪(LC-QQQ-MS)测定了样品中黄酮醇苷类、原花青素类和普洱茶素类(N-乙基-吡咯烷酮-取代黄烷-3-醇),并测定了渥堆过程样对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制效果,随后将标记化合物和降糖活性相关联,分析标记化合物活性相关性。主要研究内容和实验结果如下:(1)感官审评结果表明随着渥堆的进行,汤色、香气和滋味发生了明显的变化,在26天的渥堆结束时,普洱(熟)茶品质达到标准,汤色红褐明亮、苦涩味降低、陈香纯正。(2)通过非靶标代谢组学分析,共鉴定了对渥堆贡献较大的53个标记化合物。主要包括儿茶素、黄酮苷类物质、酚酸类物质及可水解单宁类。其中焦没食子酸、奎宁酸、theogallin、galloyl-HHDP-glucose、caffeoyl-quinic acid 等物质贡献较大。发酵前期,儿茶素类、黄酮苷类和可水解单宁的含量显著降低,而没食子酸以及儿茶素衍生物teadenol A和teadenol B等含量增加。(3)通过靶标代谢组学测定茶样中黄酮苷类、原花青素类、普洱茶素类的含量。结果显示杨梅素-3-O-半乳糖苷、槲皮素-葡萄糖苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、芦丁和山奈素-葡萄糖苷被指认为标记化合物,证明普洱茶渥堆过程中黄酮苷类物质含量变化也是造成晒青毛茶和普洱(熟)茶品质差别的重要原因。(4)体外酶活实验结果发现普洱茶对α-葡萄糖苷酶的抑制效果逐渐降低。“化学-活性”相关性分析发现EGCG、ECG和theogallin与酶活抑制率呈现正相关,丝氨酸、没食子酸、邻苯三酚和甲氧基-苯丙酸与α-葡萄糖苷酶抑制率呈现负相关。本文通过对数控发酵普洱茶过程样感官审评和化学成分整体研究,分析了 53种渥堆中变化显著的关键标记化合物,定量分析黄酮苷、原花青素和普洱茶素含量,并初步分析体外降糖活性与化学成分的关系,为普洱茶数控发酵内含物质变化提供理论依据,并对数控技术的优化提供科学支持。
其他文献
雄性哺乳动物初情期启动后睾丸发育和精子发生是重要的生理过程,对研究生殖健康有着重要的意义。DNA甲基化是生物体最常见的表观遗传修饰之一,调控基因的表达,从而影响动物生理。本研究选取初情期前后(75日龄和110日龄)的圩猪睾丸为材料,通过组织切片观察睾丸发育的组织细胞形态,利用全基因组DNA甲基化测序(whole-genome bisulfite sequencing,WGBS)和 RNA-seq
本文通过对丝瓜络纤维进行化学处理,对其的各项性能进行研究,进一步研究软化处理及干燥方式对柱状丝瓜络的物理力学性能及表观形貌等进行研究,为制备柱状丝瓜络床垫填充材料提供相应的科学理论依据。软化处理后,丝瓜络中木质素及各胶质成分部分去除,表现为纤维束表面出现明显的沟槽及空洞,从而使其整体抗压强度、峰值应力等降低。20%CH3COOH-10%NaOH软化处理后丝瓜络密度有所提高,冻干处理后丝瓜络密度较自
石斛酚是铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)中重要药用成分之一。有关铁皮石斛中石斛酚的优化提取、积累规律、药用价值等方面的研究有重要的理论和应用价值。本研究通过GC-MS和HPLC-DAD技术对铁皮石斛中石斛酚进行定性、定量分析,采用超声辅助提取和响应面法优化设计建立铁皮石斛石斛酚的测定方法,并对铁皮石斛及石斛枫斗的石斛酚含量进行检测。此外,研究铁皮
棕色棉与白色棉相比,存在纤维色泽不稳定,易分解,色素沉积不规律等不足。因此,了解棕色素化学本质及合成途径,是棕色棉研究的重要基础,以期为深入探讨棕色棉色素的合成机理提供一定的理论依据。本实验以棕色棉不同时期的棉铃为研究对象(白色棉为对照),分析棕色棉在棉纤维发育过程中其色素前体物质积累的动态变化,同时利用生物信息学手段对陆地棉PKS进行全基因组鉴定筛选,旨在为明确色素合成途径提供理论依据。主要研究
随着社会的快速发展,食品安全问题越来越严重,淡水产品中药物残留检测技术的发展已成为社会关注的热点。我国是一个虾、蟹、贝类资源丰富的国家,安徽省更是在我国淡水渔业养殖方面发挥了重要作用,鮰鱼、克氏螯虾、大闸蟹等均是安徽省的主要出口淡水产品。但是近几年,由于在淡水产品养殖过程中不规范或过量使用农兽药,部分药物通过食物链传递以及自然循环作用而富集于淡水产品体内,严重影响淡水产品质量安全,为保证我国淡水产
小麦是一种重要的粮食作物,种植区分布多。随着对小麦高产的要求不断提升,小麦寒害问题被重视起来。前人针对小麦抗寒性的研究多受自然条件的约束,即使在实验室的研究也只是从生理理化等方面间接的进行的。本论文在实验室摸索人工处理小麦的合适的低温条件,成功进行实验室小麦抗寒性的鉴定,免去不定因素太多的田间记录实验。同时尝试实验室模拟倒春寒实验,验证此方法的可行性。利用与寒害相关的基因序列,尝试开发TRAP标记
近年来,含氮元素和磷元素的废水量正逐年增加,这些有的是处理不完全,或者没有处理直接排放,使地表水受到污染,水体富营养化严重。同步聚磷脱氮技术是一种新的水污染生物除磷脱氮技术,目前对同步聚磷脱氮技术的研究逐渐成为生物治理的热点。同步聚磷脱氮技术使得除磷与脱氮能在同一个反应器中进行,相比传统生物聚磷脱氮具有诸多优势,减少污水治理成本,提高污水处理效率。国内外对聚磷脱氮菌的研究目前尚处于实验室阶段,实际
茶树(Camellia sinensis L.O.Kuntze)是我国主要经济作物之一,由于我国幅员辽阔,气候适宜,尤其是云南等地区适合茶树生长,因此我国茶树品种资源繁多。反转录转座子是最古老的转座元件之一,在基因组的结构,进化中起着十分重要的作用。由于其广泛存在于高等植物基因组中,并且具有高拷贝,高异质性等特点,与植物的抗逆性息息相关,所以成为研究植物基因组时不可或缺的研究部分。反转录转座子中一
废报纸是一种常见的生活废弃物,其富含大量的纤维素、半纤维素和矿物质元素,是一种潜在的生物炭原材料。重金属污染对生态环境的影响越发严重,而生物炭因其独特的理化性质在水体重金属处理方面具有良好的效果。本文以废报纸为原料,在N2氛围保护下制备了400℃、500℃、600℃三种不同热解温度的废报纸基生物炭吸附材料,分别标记为WBC-400、WBC-500、WBC-600。通过调节溶液初始pH、Cu2+初始
黄酮类化合物是植物重要的次生代谢产物,其衍生物具有多种生理和健康功能。研究表明类黄酮化合物B环羟基化数目与其药理作用呈正相关。因此,本实验利用羟化酶复合物HpaBC优化了 B环邻位羟基黄酮类化合物合成的条件。本文构建了多种HpaBC表达载体,根据其活性差异筛选出P2和P2&3开展了发酵条件的优化,结果表明最优的培养条件为:底物(naringenin,N)浓度80 mg/L,菌株诱导温度28℃,最适